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低密度脂蛋白受体相关蛋白4诱导小鼠重症肌无力相关细胞因子的检测

发布时间:2022-10-10 12:31
  目的:通过建立小鼠实验性自身免疫性重症肌无力(experimental autoimmune myasthenia gravis,EAMG)模型,以研究低密度脂蛋白受体相关蛋白4(low density lipoprotein receptor-related protein 4,LRP4)在重症肌无力(myasthenia gravis,MG)致病性,以及与相关细胞因子的关系。方法:选取10只8周龄雌性C57BL/6小鼠,体重为18-25g,随机分为实验组(n=5)和对照组(n=5)。采用主动免疫的方式皮下注射LRP4,以建立小鼠EAMG模型。取小鼠腓肠肌制成冰冻切片,用四甲基罗丹明结合的银环蛇毒素(TR-BTX)定位乙酰胆碱受体(AChR)(呈红色),用FITC结合的羊抗小鼠IgG抗体去定位LRP4抗体(呈绿色),再通过激光共聚焦显微镜来观察超微结构的变化。用ELISA试剂盒分别测定实验组和对照组小鼠血清血清中细胞因子IL-12、IFN-γ、IL-17的浓度。结果:实验组中有一只小鼠左眼周边脱毛,无法睁开,实验组中部分小鼠表现为活动迟缓,撕咬抓取能力变弱,体重略微下降。通过激光共聚... 

【文章页数】:40 页

【学位级别】:硕士

【文章目录】:
摘要
Abstract
中英文对照
第一章 前言
第二章 实验材料
    2.1 实验动物
    2.2 主要实验仪器
    2.3 实验试剂
    2.4 溶液的配制
第三章 实验方法
    3.1 小鼠EAMG模型的建立
        3.1.1 皮下注射给药
        3.1.2 小鼠体重、行为观察及评分
        3.1.3 小鼠眼球取血
    3.2 免疫荧光试验
        3.2.1 冰冻切片的制备
        3.2.2 免疫荧光染色及观察
    3.3 血清中IL-12、IFN-γ、IL-17浓度的检测
    3.4 统计学方法
第四章 结果
    4.1 小鼠的临床表现
    4.2 EAMG模型临床评分
    4.3 小鼠体重的变化
    4.4 免疫荧光观察
    4.5 血清中IL-12的浓度
    4.6 血清中IFN-γ的浓度
    4.7 血清中IL-17的浓度
第五章 讨论
结论
参考文献
致谢



本文编号:3689627

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