BAG-1沉默对OGD/R诱导人神经母细胞瘤细胞凋亡及HSP70表达的影响

发布时间：2023-03-28 11:26

　　目的探讨慢病毒介导的RNA干扰技术(RNA interference,RNAi)下调BCL-2结合抗凋亡基因(BCL-2 associated anthanogen-1,BAG-1)表达对氧糖剥夺/再复氧诱导人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)凋亡及热休克蛋白70(Heat Shock Protein 70,HSP70)表达的影响。方法构建靶向BAG-1 RNAi慢病毒载体,感染对数生长期的SH-SY5Y细胞,抑制BAG-1表达。采用荧光显微镜观察荧光,嘌呤霉素筛选细胞,保证感染效率>75%。转染成功后细胞分组如下:正常细胞组(未感染慢病毒的正常SH-SY5Y细胞);慢病毒对照组[感染含增强绿色荧光蛋白(EGFP)基因的慢病毒];BAG-1 RNAi组(即BAG-1基因沉默组,感染含BAG-1基因干扰序列及EGFP的慢病毒),根据所用序列不同分为BAG-1 RNAi-α组、BAG-1 RNAi-β组。慢病毒感染后72 h采用蛋白质免疫印迹实验(Western Blot)检测BAG-1 RNAi组细胞BAG-1蛋白表达情况,确定干扰效果。4组细胞分别给予氧糖剥夺4 h,8 h,12...

【文章页数】：60 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
引言
材料与方法
    1 实验对象
    2 实验材料
    3 实验方法
    4 统计学分析
    5 实验流程图
结果
    1 SH-SY5Y细胞形态学观察
    2 慢病毒感染及BAG-1 基因沉默效果
    3 BAG-1 基因沉默导致OGD/R损伤SH-SY5Y细胞活性下降
    4 BAG-1 基因沉默导致OGD/R诱导SH-SY5Y细胞凋亡增加
    5 BAG-1 基因沉默对OGD/R损伤SH-SY5Y细胞HSP70表达的影响
讨论
结论
参考文献
综述
    综述参考文献
攻读学位期间的研究成果
缩略词表
致谢



本文编号：3772880