Pumilio-2在难治性癫痫患者及匹罗卡品致痫大鼠脑组织中的表达研究
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【摘要】:目的:检测Pumilio2 (Pum2)在难治性癫痫患者和氯化锂-匹罗卡品诱导的癫痫大鼠模型脑组织中的表达变化情况,以探讨其在癫痫发生发展中的作用。方法:1.收集20例难治性癫痫患者的手术切除颞叶脑标本,并收集20例严重脑外伤患者的颞叶手术切除标本作为对照。2.选择成年雄性S-D大鼠建立氯化锂-匹罗卡品癫痫模型,按照癫痫发展的不同阶段将大鼠随机分成7个组,分别是生理盐水对照组、癫痫大发作后1天、3天、7天、14天、30天和60天组。3.用实时荧光定量PCR检测miR-134、Pum2和Nav1.6的表达水平,免疫印迹和免疫组织化学染色技术进一步验证Pun2的表达水平,用免疫组织荧光双标技术对Pum2进行细胞定位,用Golgi染色检测神经元树突形态的变化。结果:1.miR-134在大鼠癫痫模型中各时间点表达均升高,除外癫痫大发作后7天和14天,在1天、3天、30天和60天时与对照组相比差异都有统计学意义(p0.05)。2.Pum2在难治性癫痫患者脑组织中的表达显著低于正常对照组(p0.05)。3.Pum2在大鼠癫痫模型中的表达下降,实时荧光定量PCR和免疫印迹分析结果表明Pum2在癫痫大发作后各时间点的表达均显著低于正常对照组(p0.05),免疫组织化学染色显示Pum2在癫痫大发作后3天、7天、14天、30天和60天的表达明显低于正常对照组(p0.05),1天时Pum2的表达降低,但差异无统计学意义(p0.05)。4.免疫组织荧光双标技术提示Pum2定位于神经元胞浆和树突内,在细胞核以及星形胶质细胞中均无表达。5.匹罗卡品诱导的癫痫大鼠海马区神经元树突的分支和长度增加,与对照组相比有统计学差异(p0.05)。6.Nav1.6在大鼠癫痫模型中各时间点表达均升高,除外癫痫大发作后60天,其余时间点与对照组相比差异都有统计学意义(p0.05)。结论:Pum2在难治性癫痫患者和氯化锂/匹罗卡品诱导的癫痫大鼠模型中的表达降低,其可能在癫痫的发生和发病机制中具有一定的作用。
【关键词】:癫痫 Pumilio2 匹罗卡品 兴奋性环路
【学位授予单位】:重庆医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2015
【分类号】:R742.1
【目录】:
- 英汉缩略语名词对照5-8
- 中文摘要8-10
- 英文摘要10-13
- 前言13-16
- 1 材料与方法16-29
- 2 结果29-36
- 3 讨论36-39
- 4 小结39-40
- 全文总结40-41
- 参考文献41-45
- 文献综述45-53
- 参考文献50-53
- 致谢53-54
- 硕士期间发表的论文54
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