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鞘内注射AM22-52对大鼠神经损伤诱发脊髓和背根神经节改变的影响

发布时间:2023-04-19 20:23
  研究背景及目的:肾上腺髓质素(Adrenomedullin,AM)最早是从人嗜铬细胞瘤的细胞中分离出来的并根据其能在血小板中生成cAMP的能力对其进行标识[1]。AM产生于血管平滑肌细胞和内皮细胞,目前多项研究表明AM及其受体在脊髓背角以及背根神经节中亦有分布,这就提示我们注意AM与疼痛的关系。我们实验室已往研究表明AM在可引发神经病理性疼痛。基于本实验室的研究成果以及其他学者研究,本实验拟进一步探究肾上腺髓质素及其受体在慢性神经病理性疼痛中的致痛机制。研究方法:(1)应用行为学方法,在构建大鼠脊神经结扎(spinal nerve ligation,SNL)神经病理性疼痛模型后,实验组鞘内连续注射7天AM受体拮抗剂AM22-52,与假手术组(Sham组)及SNL对照组对比,记录对比大鼠机械撤足阈值(paw withdrawal mechanical threshold,PWMT)的变化;(2)利用蛋白免疫印迹法(western blotting,WB)检测和比较假手术组、SNL对照组与SNL实验组手术同侧脊髓腰膨大部位的脊髓背角中胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary ac...

【文章页数】:76 页

【学位级别】:硕士

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中文摘要
Abstract
中文文摘
绪论
    1. 神经病理性疼痛
    2. AM及AM22-52
    3. 神经元与胶质细胞
        3.1 星形胶质细胞
        3.2 DRG神经元与卫星胶质细胞
    4. IL-1β、nNOS与疼痛
        4.1 白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)
        4.2 神经元型一氧化氮合醉(neuronal nitric oxide synthase, nNOS)
    5. 外周和中枢敏化机制
    6. 本课题研究的背景及意义
第一章 鞘内注射AM22-52对SNL诱导机械痛觉超敏的作用
    1. 前言
    2. 实验材料
        2.1 实验动物
        2.2 主要实验仪器和器材
        2.3 实验药品与试剂
    3. 实验分组与方法
        3.1 实验分组
        3.2 实验方法
    4. 实验结果
    5. 讨论
第二章 鞘内注射AM22-52对SNL诱导脊髓背角GFAP表达的影响
    1. 前言
    2. 实验材料
        2.1 实验动物
        2.2 实验仪器
        2.3 实验药品与试剂
    3. 实验分组
    4. 实验方法
        4.1 组织蛋白的提取
        4.2 BCA蛋白定量
        4.3 Western blot操作步骤
    5. Western Blot实验结果
    6. 讨论
第三章 鞘内注射AM22-52对SNL大鼠脊髓背角IL-1β、 nNOS表达的影响
    1. 前言
    2. 实验材料
        2.1 实验动物
        2.2 实验仪器
        2.3 实验药品与试剂
    3. 实验分组
    4. 实验方法
    5. Western Blot实验结果
        5.1 鞘内注射AM22-52对SNL诱导脊髓背角nNOS表达的影响
        5.2 鞘内注射AM22-52对SNL诱导脊髓背角IL-1β蛋白表达的影响
    6. 讨论
第四章 鞘内注射AM22-52对SNL大鼠DRG中GFAP、IL-1β、nNOS的mRNA表达的影响
    1. 前言
    2. 实验材料
        2.1 实验仪器与器材
        2.2 实验试剂
        2.3 材料获取
    3. 实验方法
        3.1 总RNA的提取
        3.2 RNA纯度及浓度检测
        3.3 逆转录
        3.4 qRT PCR
        3.5 实验数据统计分析
    4. 实验结果
    5. 讨论
第五章 结论
附录1
参考文献
攻读学位期间承担的科研任务与主要成果
致谢
个人简历



本文编号:3794158

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