增龄和预运动训练在小鼠帕金森发病中的作用：线粒体与自噬途径的分子生理学机制研究

发布时间：2023-05-13 14:21

　　目的：帕金森病(PD)是严重威胁中老年人群的神经变性性疾病。最近研究表明自噬在清除与神经变性疾病相关的细胞器方面起关键作用，尤其在PD的发生、发展过程中发挥重要作用，但其相关机制尚不明确。本研究以增龄小鼠为模型，通过腹腔注射MPTP建立PD模型，研究自噬的增龄性改变对MPTP毒性机制的影响，及其与线粒体功能，线粒体动力学变化之间的关系；同时选取青年小鼠进行中等强度跑台训练，6周后建立PD模型，探讨运动预训练对PD小鼠以上各项指标的影响；建立MPP⁺诱导的离体PC12细胞PD模型，使用药物调控自噬水平，探究自噬与PD，自噬与线粒体动力学和线粒体功能的关系。 方法： 1、90只雄性C57BL/6小鼠分为6组：4月龄对照组(4MC)、4月PD模型组(4MP)、8月龄对照组(8MC)、8月龄PD模型组(8MP)、15月龄对照组(15MC)和15月龄PD模型组(15MP)，每组15只。注射MPTP(1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶)(30mg/kg×2次，ip，间隔16小时)制作PD模型。自然增龄组动物在相同时间以同方式接受同等剂量的生理盐水。观察各组小鼠行为学...

【文章页数】：138 页

【学位级别】：博士

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缩略词表
中文摘要
Abstract
前言
第一部分 增龄在MPTP致小鼠帕金森发病中的作用：线粒体与自噬途径的分子生理学机制探讨
    1 实验材料及研究方法
        1.1 实验材料与仪器
        1.2 实验方法
        1.3 统计学处理
    2 实验结果
        2.1 各增龄组，增龄PD模型组小鼠行为学变化
        2.2 各增龄组，增龄PD模型组小鼠中脑黑质细胞数的变化
        2.3 各增龄组，增龄PD模型组小鼠中脑黑质透射电镜观察神经元超微结构变化
        2.4 各增龄组，增龄PD模型组小鼠中脑和纹状体线粒体功能的变化
        2.5 各增龄组，增龄PD模型组小鼠中脑和纹状体线粒体 ROS 生成速率变化
        2.6 各增龄组，增龄PD模型组小鼠中脑和纹状体线粒体融合分裂蛋白的变化
        2.7 各增龄组，增龄PD模型组小鼠中脑和纹状体自噬相关蛋白Beclin1，LC3-II 表达的变化
    3 讨论
        3.1 增龄对小鼠中脑和纹状体线粒体ROS生成，线粒体呼吸功能，线粒体动力学和自噬蛋白的影响
        3.2 MPTP对小鼠中脑和纹状体线粒体ROS生成，线粒体呼吸功能，线粒体动力学和自噬蛋白的影响
第二部分 预运动训练在缓解 MPTP 致小鼠帕金森发病中的作用：线粒体与自噬的分子机制研究
    1 实验材料及研究方法
        1.1 实验材料与仪器
        1.2 实验方法
        1.3 统计学处理
    2 实验结果
        2.1 各组小鼠行为学变化
        2.2 小鼠中脑黑质细胞数的变化
        2.3 透射电镜观察小鼠中脑黑质神经元超微结构变化
        2.4 小鼠中脑和纹状体线粒体呼吸功能的变化
        2.5 小鼠中脑和纹状体线粒体ROS生成速率变化
        2.6 小鼠中脑和纹状体线粒体融合分裂基因和蛋白的变化
        2.7 小鼠中脑和纹状体组织Beclin1、LC3基因和蛋白表达的变化
        2.8 小鼠血清，中脑和纹状体组织中GDNF含量的变化
    3 讨论
        3.1 预运动训练对正常小鼠和PD模型小鼠行为学和黑质TH阳性细胞数的影响
        3.2 预运动训练对正常小鼠和PD模型小鼠中脑和纹状体线粒体ROS生成，线粒体呼吸功能的影响
        3.3 预运动训练对正常小鼠和PD模型小鼠中脑和纹状体线粒体动力学和自噬水平的影响
第三部分 MPP⁺诱导的PD细胞模型中自噬与线粒体动力学的改变和相关机制研究
    1 实验材料及研究方法
        1.1 实验材料与仪器
        1.2 实验方法
        1.3 统计学处理
    2 实验结果
        2.1 MPP⁺及不同药物干预对PC12细胞存活率的影响
        2.2 不同药物干预对MPP⁺诱导的PC12细胞MDA含量的影响
        2.3 透射电镜观察不同药物干预对 MPP⁺诱导的PC12细胞超微结构的影响
        2.4 激光共聚焦观察线粒体自噬发生
        2.5 不同药物干预对PC12 细胞线粒体膜通道孔开放程度的影响
        2.6 不同药物干预对MPP⁺诱导的PC12细胞线粒体膜电位的影响
        2.7 不同药物干预对MPP⁺诱导的PC12细胞自噬蛋白Beclin 1，LC3-II含量的影响
        2.8 不同药物干预对MPP⁺诱导的PC12细胞线粒体融合和分裂相关蛋白表达的影响
    3 讨论
        3.1 不同药物干预对MPP⁺诱导的PD细胞模型损伤的影响
        3.2 不同药物干预对MPP⁺诱导的PD细胞模型线粒体渗透性转运和膜电位的影响
        3.3 不同药物干预对MPP⁺诱导的PD细胞模型中自噬与线粒体动力学蛋白的影响
第四部分 结论
参考文献
文献综述
    综述参考文献
个人简历
致谢



本文编号：3815993