胎盘来源3D球体间充质干细胞对大鼠脑缺血/再灌注损伤Caspase-3的影响

发布时间：2023-05-13 15:27

　　研究背景:脑梗塞,是一种由于大脑血管堵塞而导致脑缺血性发作的疾病,已经严重危害到人类的健康。血栓溶解疗法和脑保护疗法已经应用于临床治疗脑梗塞。但是随着脑部科学的发展与探索和神经再生技术领域的研究拓展,细胞疗法和细胞替代疗法已经成为近年来的热点。本研究旨在探讨间充质干细胞在脑缺血再灌注大鼠的神经功能恢复和caspase-3在神经细胞表达的影响。方法:建立大鼠脑梗死模型。治疗组注射2106脐带血间充质干细胞;假手术组和对照组注入相同数量的培养基。在注射治疗之前和注射后1天,3天,7天分别进行神经功能评分。Caspase-3mRNA和蛋白的表达水平的检测分别使用RT-PCR法和免疫组织化学法。细胞凋亡的分析评估用TUNEL工具包。结果:被标记过得脐带血间充质干细胞注入大鼠后治疗组大鼠的神经功能恢复相比于对照组有明显改善。RT-PCR和免疫组织化学的实验结果表明caspase-3的表达水平与对照组相比较有显著地减少,而假手术组和对照组没有显著差异。细胞凋亡结果表明治疗组和对照组相比,TUNEL检测的阳性细胞会有减少。结论:脐带血来源的间充质干细胞能够促进脑缺血再灌注大鼠的神经功能恢复并且减少c...

【文章页数】：45 页

【学位级别】：硕士

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摘要
Abstract
引言
1. 第一章 实验材料
    1.1. 实验动物
    1.2. 实验器材
        1.2.1. 手术器械
        1.2.2. 辅助器材
    1.3. 实验仪器和设备
    1.4. 主要实验试剂及试剂配制
        1.4.1. 主要实验试剂
        1.4.2. 主要试剂配制
2. 第二章 实验方法
    2.1. 动物模型的制作
        2.1.1. 大鼠准备
        2.1.2. 线栓的制备
        2.1.3. 大鼠手术
        2.1.4. 术后评分
        2.1.5. 实验动物分组
    2.2. TTC染色
    2.3. 大鼠的治疗
    2.4. Caspase-3PCR检测
        2.4.1. RNA提取
        2.4.2. RNA反转录成cDNA
        2.4.3. RT—PCR
        2.4.4. 琼脂糖凝胶电泳检测基因表达
    2.5. caspase-3 免疫组化检测
        2.5.1. 大鼠灌注
        2.5.2. 脑组织切片
        2.5.3. 免疫组织化学染色
    2.6. Caspase-3WesternbIot的检测
        2.6.1. 总蛋白提取
        2.6.2. WesternbIot技术步骤
            2.6.2.1. SDS-PAGE电泳
            2.6.2.2. 电转膜(湿转)
            2.6.2.3. 免疫反应
            2.6.2.4. 化学发光及曝光
            2.6.2.5. 凝胶图象分析
    2.7. 神经细胞凋亡检测
        2.7.1. 实验试剂
        2.7.2. 实验器材
        2.7.3. 实验方法
    2.8. 统计学分析
3. 第三章 结果
    3.1. TTC染色结果
    3.2. DiL标记的MSCs在脑组织中的分布
    3.3. 神经功能评分
    3.4. MSCs对缺血再灌注大鼠脑组织caspase-3 表达的影响
    3.5. MSCs对缺血再灌注大鼠脑组织Caspase-3 蛋白表达的影响
    3.6. 结果汇总
4. 第四章 讨论
    4.1. 实验注射方法的选取和检测指标的选取
    4.2. 实验结果讨论与分析
参考文献
综述
    综述参考文献
攻读学位期间的研究成果
致谢



本文编号：3816097