miR-155通过激活缺血性脑组织中的自噬参与神经损伤

发布时间：2024-02-24 01:22

　　目的探讨自噬与脑缺血之间的关系,以及miR-155在缺血脑组织中对自噬的影响。方法线栓法制备大脑中动脉闭塞(MCAO)模型,行为学测试包括神经功能缺损评分和转角试验测评,Western blotting测定LC3B和p62蛋白表达,RT-PCR测定ULK1和Beclin基因水平。结果与MCAO组相比,过表达miR-155组自噬相关蛋白LC3 II和ULK1、Beclin 1基因显著增高,神经功能缺损评分升高;miR-155敲除小鼠中自噬蛋白LC3 II和ULK1、Beclin 1基因降低;而添加自噬抑制剂抑制miR-155诱导缺血自噬后,神经功能缺损评分降低,自噬相关蛋白LC3 II和ULK1、Beclin 1基因均下降。结论证实miR-155激活了缺血诱导的自噬,而应用自噬抑制剂可以阻滞miR-155的有害作用。在缺血性脑组织中沉默miR-155不仅可以抑制自噬,还可以减轻神经功能缺损评分,改善自噬导致的脑缺血损伤。

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【部分图文】：

图1脑缺血损伤后LC3B、p62与ULK1、Beclin1的表达

1.脑缺血性损伤可以诱导自噬（图1)与野生型（WT）组相比，MCAO组小鼠脑组织中LC3II明显升高，并且p62蛋白（一种调节自噬清除的蛋白）显著减少。为了进一步确证，本文检测了自噬相关基因的mRNA水平，qPCR结果显示，MCAO组小鼠的ULK1和Beclin1水平高于....

图2miR-155敲除与过表达后各组LC3B、p62与ULK1、Beclin1的表达

2.缺血诱导的miR-155激活缺血脑组织中的自噬（图2)为了检测miR-155在缺血脑组织中对自噬的作用，本文采取了miR-155KO小鼠和注射了pAdmiR-155的过表达小鼠。与MCAO组小鼠相比，miR-155KO组小鼠脑组织中LC3II水平显著降低，而....

图3各组神经功能缺失评分与转角试验

3.自噬在缺血性脑损伤中的作用（图3)为了揭示自噬在本研究中究竟对缺血性脑损伤是有害还是保护作用，本文采用了添加自噬抑制剂LY294002，通过神经功能缺损评分和转角试验进行了小鼠的行为测试。与WT组小鼠相比，MCAO组小鼠表现出更高的神经功能缺损分值。而MCAO+LY29400....

图4应用自噬抑制剂后各组LC3B、p62与ULK1、Beclin1的表达

4.miR-155诱导的自噬参与了神经系统的缺血损伤（图4)上一部分实验结果显示抑制miR-155介导的自噬，可以减轻神经功能损伤，进一步观察了小鼠脑组织中自噬相关蛋白及基因的表达变化。与MCAO组小鼠相比，添加LY294002的MCAO小鼠脑组织中，LC3II水平显著降低....

本文编号：3908293