NGF/MAG双基因共表达腺病毒修复大鼠周围神经损伤的实验研究

发布时间：2024-03-22 00:50

　　目的构建携带NGF及髓磷脂相关糖蛋白(myelin associated glycoprotein,MAG)基因序列的双基因共表达腺病毒(adenovirus expressing NGF and MAG,Ad-NGF-MAG),探讨其在大鼠坐骨神经损伤修复中的作用。方法将NGF和MAG共同克隆至5型腺病毒穿梭质粒p CA 13,并在HEK 293细胞中包装得到重组腺病毒Ad-NGF-MAG并测序鉴定。取雄性SD大鼠32只,体质量180²00 g;随机分成4组(n=8):对照组(正常对照)、空病毒组(Ad组)、单独表达NGF组(Ad-NGF组)和共表达NGF、MAG组(Ad-NGF-MAG组)。Ad组、AdNGF组和Ad-NGF-MAG组大鼠制备右侧坐骨神经损伤模型后,分别于术侧腓肠肌注射空腺病毒、Ad-NGF及AdNGF-MAG(1×108 PFU),隔天1次,共3次。对照组仅暴露右侧坐骨神经后关闭切口,术后对应时间点注射生理盐水10μL。术后31 d,分别行坐骨神经功能指数(sciatic nerve function index,SFI)、神经电生理检测;切...

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【部分图文】：

图1各质粒酶切鉴定结果

中国修复重建外科杂志2016年8月第30卷第8期1031图1各质粒酶切鉴定结果apCA13-SV40promoter-EGFP质粒酶切鉴定M：Marker1：XbaⅠ、BamHⅠ双酶切pCA13-SV40promoter-EGFP质粒产物2：NheⅠ、BamHⅠ双酶切pCA13-....

图3RT-PCR检测Ad-NGF或Ad-NGF-MAG感染HEK293细胞后MAG和NGFmRNA表达1：Ad组2：Ad-NGF组3：Ad-NGF-MAG组图4Westernblot检测Ad-NGF或Ad-NGF-MAG感染HEK293细胞后MAG和NGF蛋白表达1：Ad组2：Ad-NGF组3：Ad-NGF-MAG组图5RT-PCR检测各组NGF和MAGmRNA表达1：对照组2：Ad组3：Ad-NGF组4：Ad-NGF-MAG组图6Westernblot检测各组NGF和MAG蛋白表达1：对照组2：Ad组3：Ad-NGF组4：Ad-NGF-MAG组图7各组组织学观察（HE×100）

1032ChineseJournalofReparativeandReconstructiveSurgery,August2016,Vol.30,No.8图3RT-PCR检测Ad-NGF或Ad-NGF-MAG感染HEK293细胞后MAG和NGFmRNA表达1：Ad组2：Ad-NG....

图1各质粒酶切鉴定结果

中国修复重建外科杂志2016年8月第30卷第8期1031图1各质粒酶切鉴定结果apCA13-SV40promoter-EGFP质粒酶切鉴定M：Marker1：XbaⅠ、BamHⅠ双酶切pCA13-SV40promoter-EGFP质粒产物2：NheⅠ、BamHⅠ双酶切pCA13-....

图3RT-PCR检测Ad-NGF或Ad-NGF-MAG感染HEK293细胞后MAG和NGFmRNA表达1：Ad组2：Ad-NGF组3：Ad-NGF-MAG组图4Westernblot检测Ad-NGF或Ad-NGF-MAG感染HEK293细胞后MAG和NGF蛋白表达1：Ad组2：Ad-NGF组3：Ad-NGF-MAG组图5RT-PCR检测各组NGF和MAGmRNA表达1：对照组2：Ad组3：Ad-NGF组4：Ad-NGF-MAG组图6Westernblot检测各组NGF和MAG蛋白表达1：对照组2：Ad组3：Ad-NGF组4：Ad-NGF-MAG组图7各组组织学观察（HE×100）

1032ChineseJournalofReparativeandReconstructiveSurgery,August2016,Vol.30,No.8图3RT-PCR检测Ad-NGF或Ad-NGF-MAG感染HEK293细胞后MAG和NGFmRNA表达1：Ad组2：Ad-NG....

本文编号：3934382