小胶质细胞在EAE中的活化及其作用的实验研究

发布时间：2024-04-16 04:51

　　本研究利用实验性自身免疫性脑脊髓炎模型，观察不同神经功能评分EAE的病理学变化，并检测中枢神经系统内小胶质细胞的活化及CD4+T细胞的变化，观察二者的相互作用，试图探讨小胶质细胞在MS/EAE发病和缓解中的作用。应用荧光定量PCR观察CD4+T细胞和小胶质细胞在mRNA水平上的变化，同时观察脑组织内细胞因子IFN-γ、IL-17、IL-10的变化，探讨这些细胞因子在EAE发病过程中的作用。为此，我们用MOG35-55抗原辅以完全弗氏佐剂免疫C57BL/6小鼠，通过对小鼠体重、症状及中枢神经系统病理改变的观察，评估EAE模型的建立情况，采用国际公认的神经功能评分标准对发病小鼠的临床症状进行评分。同时利用病理学染色观察EAE小鼠不同时期的病理学改变，用HE染色、LuxolFast Blue髓鞘染色和Bielschowsky银染分别评估炎性细胞浸润、髓鞘脱失和轴索损伤情况。利用免疫组织化学染色法对CD4+T细胞和小胶质细胞进行标记，观察两种细胞的变化及二者之间是否存在相互作用。应用荧光定量PCR技术验证二者在mRNA水平上的变化。用半定量PCR和荧光定量PCR检测不同病程分期EAE小鼠脑组织...

【文章页数】：36 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
一、前言
二、材料和方法
    1 试剂和仪器
        1.1 主要试剂
        1.2 主要仪器
    2 实验方法
        2.1 EAE 模型的建立和病理学观察
        2.2 CD4+T 细胞和小胶质细胞的活化及形态变化
        2.3 半定量和定量 PCR 检测细胞因子的变化
        2.4 统计学分析
三、结果
    1 EAE 模型的建立和病理学观察
        1.1 小鼠行为学变化
        1.2 小鼠脊髓病理学染色结果
    2 CD4+T 细胞和小胶质细胞的数量及形态变化
        2.1 CD4+T 细胞免疫组化染色结果
        2.2 小胶质细胞免疫组化染色结果
        2.3 小胶质细胞形态变化结果
        2.4 荧光定量 PCR 检测 CD4+T 细胞和小胶质细胞 mRNA 的表达
    3 半定量和定量 PCR 检测细胞因子的变化
        3.1 半定量 PCR 检测小鼠脑组织内细胞因子 mRNA 的表达
        3.2 荧光定量 PCR 检测小鼠脑组织内细胞因子 mRNA 的表达
四、讨论
    1. EAE 模型建立
    2. CD4+T 细胞在 EAE 中的作用
    3. 小胶质细胞在 EAE 中的作用
    4. CD4+T 细胞与小胶质细胞的关系
五、结论
参考文献
在校期间发表的学术论文
致谢



本文编号：3956474