HER2小分子干扰RNA对脑膜瘤细胞增殖影响的研究

发布时间：2024-05-18 11:11

　　目的：应用化学合成的siRNA在体外抑制人脑膜瘤细胞HER2基因的表达，探讨化学合成的siRNA介导的RNAi在脑膜瘤基因治疗的可行性。 方法：从新鲜无菌脑膜瘤组织中提取出原代细胞进行培养，并人工纯化、传代。选取免疫细胞化学法鉴定为HER2蛋白表达阳性的脑膜瘤细胞，设计并合成针对HER2基因的小分子干扰RNA，选用阳离子脂质体Lipofectamine2000作为转染试剂,同时设立空白组、空载体组、非特异性siRNA组、及HER2siRNA组；应用脂质体转染法将siRNA导入纯化的脑膜瘤细胞内，48小时后免疫细胞化学法检测转染后各组脑膜瘤细胞中HER2、Ki-67蛋白的表达。 结果：经EMA、Vimetin、HER2免疫细胞化学检测，HER2阳性表达的脑膜瘤细胞原代培养取得成功，经过转染后免疫细胞化学检测显示HER2siRNA组较空白组、空载体组、非特异性siRNA组的HER2、Ki-67蛋白表达明显下降(P<0.01)；而空白组、空载体组、非特异性siRNA组的HER2、Ki-67蛋白表达无明显变化(P>0.05)，采用Spearman等级相关分析,提示脑膜瘤细胞中HER...

【文章页数】：43 页

【学位级别】：硕士

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摘要
ABSTRACT
缩略词简表
第1章 引言
第2章 材料和方法
    2.1 实验材料
        2.1.1 脑膜瘤标本
        2.1.2 主要的试剂
        2.1.3 主要仪器
    2.2 方法
        2.2.1 脑膜瘤细胞原代培养
        2.2.2 脑膜瘤细胞的传代培养
        2.2.3 脑膜瘤培养细胞的形态学观察
        2.2.4 脑膜瘤细胞的鉴定
        2.2.5 脑膜瘤培养细胞转染
        2.2.6 Elivision^TM免疫细胞化学法检查转染后脑膜瘤细胞中 HER2、Ki-67蛋白的表达
        2.2.7 统计学分析
第3章 结果
    3.1 脑膜瘤病理组织学检查：
    3.2 脑膜瘤原代培养细胞免疫组化鉴定
    3.3 脑膜瘤培养细胞形态学观察
    3.4 HER2 蛋白在转染后各组脑膜瘤细胞中的表达
    3.5 Ki-67 在转染后各组脑膜瘤细胞中的表达
    3.6 HER2 及 Ki-67 在脑膜瘤细胞中表达的相关性
第4章 讨论
第5章 结论
致谢
参考文献
攻读学位期间的研究成果
综述
    参考文献



本文编号：3976844