EPI-NCSCs和OECs联合移植对大鼠周围神经缺损修复的炎性/免疫调节作用

发布时间：2024-05-18 14:08

　　周围神经的缺损修复是神经外科一直面临的难题,常由交通意外、工矿事故、枪支伤等引起,损伤多为挫裂或缺损,手术吻合困难,常需神经移植修复。周围神经损伤后的修复效果并不理想,其原因除了与神经组织的高度分化、周围神经纤维的再生速度比较缓慢、再生神经纤维难以和靶组织形成有效突触联系外,周围神经损伤后的炎性/免疫反应可能也有重要影响。周围神经的炎性/免疫调节主要包括炎性因子的分泌调控和炎性细胞的浸润。因此,调节炎性细胞因子分泌的动态平衡和炎性细胞的活化是控制其炎性/免疫反应的关键。组织工程学的发展使细胞移植技术治疗神经损伤成为近年研究的热点。表皮神经嵴干细胞(epidermal neural crest stem cell,EPI-NCSCs)能够分泌多种神经营养因子和血管生成因子等,同时自身还能分化为周围神经系统神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞;嗅鞘细胞(olfactory ensheathing cells,OECs)能够分泌多种神经营养因子(NT-3/4/5,BDNF,GDNF,CNTF,NGF等),表达炎性蛋白(S-100,Nexin,神经胶质源性连接蛋白等),促进血管生成,髓鞘的再生,...

【文章页数】：83 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图1EPI-NCSCs的原代培养及鉴定Fig.1PrimarycultureandidentificationofEPI-NCSCsA.细胞培养7d时在倒置相差显微镜下观察到的细胞形态（×40）;B.细胞培养11d时在倒置相差显微镜下观察到的细胞形态（×40）;C.细胞培养11d时SOX10免疫荧光染色的观察（×400）;D.细胞培养11d时Nestin免疫荧光染色的观察（×400）;E.培养11dGFP免疫荧光的观察（×400）;F.C、D和E叠加图（×400）.

西南大学硕士学位论文OECs的形态学观察、鉴定及细胞纯度的计算胞培养7d时，细胞增殖明显，细胞形态主要为双极形（图2.A）。培时，细胞的形态清楚，胞体较小，细胞的突起更细长，细胞的网状结构2.B）。进行NGFRp75、S-100和Hoechst33342的免疫....

图2OECs的原代培养及鉴定Fig.2PrimarycultureandidentificationofOECsA.细胞培养7d时在倒置相差显微镜下观察到的细胞形态（×40）;B.细胞培养10d时在倒置相差显微镜下观察到的细胞形态（×40）;C.培养10dNGFRp75免疫荧光染色观察（×200）;D.培养10dS-100免疫荧光染色观察（×200）;E.培养10dHoechst33342免疫荧光染色观察（×200）;F.C、D和E叠加图（×200）.

第3章EPI-NCSCs和OECs的分离培养与鉴定ogicalobservationofEPI-NCSCsunderinvertedphasecontrastmicroscopeat11days(×40);C.fluorescencesta....

图3PLGA导管(A)及电镜下的PLGA膜结构(B).标尺为100μm.

第4章EPI-NCSCs和OECs联合移植对大鼠缺损坐骨神经炎性细胞因子表达的研究.2方法2.1PLGA神经导管的制备参考Sundback等[114]方法。将PLGA粉末（85:15）溶于三氯甲烷中制备成W/V）的溶液，用自制模具制得长度为15mm，内径为1.....

图4手术过程Fig.4Operationprocess

图4手术过程Fig.4Operationprocess4.2.4Westernblot检测IL-4、IL-6、IL-13和TNF-α的表达术后1、3d以及1、2、3w，每组各取3只大鼠同上法麻醉后，按照原手术入路，暴露并取出包括PLGA导管....

本文编号：3977039