miR-1197抑制MGMT表达对胶质瘤替莫唑胺耐药性的影响

发布时间：2025-04-15 00:34

　　 目的探讨miR-1197是否通过抑制O6-甲基鸟嘌呤DNA甲基转移酶(MGMT)的表达影响胶质瘤对替莫唑胺的耐药性。方法采用qRT-PCR检测胶质瘤及非肿瘤脑组织中miR-1197的表达水平,CCK-8及单克隆实验检测胶质瘤细胞的增殖能力,流式细胞术检测胶质瘤细胞的凋亡率。应用Western blot检测胶质瘤组织及细胞中MGMT及相关蛋白的表达;用荧光素酶基因报告实验验证miR-1197与MGMT的结合。用裸鼠皮下成瘤实验验证miR-1197对胶质瘤对替莫唑胺耐药性的影响。结果生物医学数据库及胶质瘤组织样本分析显示miR-1197在胶质瘤中低表达。荧光素酶基因报告实验显示,miR-1197可以与MGMT的3'-UTR相结合,过表达miR-1197可抑制MGMT的表达。单克隆及流式细胞术结果表明,miR-1197过表达可促进替莫唑胺诱导的细胞凋亡,但其可以被MGMT所逆转。裸鼠皮下成瘤实验表明miR-1197过表达增加胶质瘤对替莫唑胺的敏感性。结论 miR-1197通过与MGMT的3'-UTR相结合,抑制MGMT表达,进而促进胶质瘤对替莫唑胺的敏感性。

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【部分图文】：

图1 胶质瘤组织的miR-1197表达及相关基因的分析

生物信息学软件预测分析发现MGMT的3"-UTR端含有一个miR-1197的结合位点(图2A)。通过荧光素酶基因报告实验发现，miR-1197可显著抑制野生型MGMT报告基因质粒的荧光强度，而结合位点的突变则可阻止miR-1197对报告基因质粒的荧光强度的影响(图2B)。本研究分....

图2 miR-1197直接靶向抑制MGMT的表达

图1胶质瘤组织的miR-1197表达及相关基因的分析2.3miR-1197通过MGMT影响胶质瘤细胞的TMZ耐药性

图3 miR-1197过表达增加胶质瘤细胞对TMZ的敏感性

裸鼠皮下成瘤体内实验结果显示，转染miR-1197的实验组裸鼠的肿瘤明显小于对照组(图4A)，肿瘤细胞的生长速度显著慢于对照组(图4C)，且肿瘤质量也小于对照组(图4D)。免疫组化分析表明，实验组MGMT的水平显著低于对照组(图4B)。Westernblot实验显示MGMT在胶....

图4 miR-1197过表达增强TMZ对皮下胶质瘤的抑制作用

图3miR-1197过表达增加胶质瘤细胞对TMZ的敏感性3讨论

本文编号：4039793