侧脑室注射Apelin-13在脑缺血—再灌注损伤细胞凋亡过程中的神经保护作用

发布时间：2017-06-04 08:17

  本文关键词：侧脑室注射Apelin-13在脑缺血—再灌注损伤细胞凋亡过程中的神经保护作用，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：背景在临床脑血管疾病中,缺血性脑卒中占比例较大,严重危害人类健康。目前临床上最有效的治疗措施是早期溶栓,却不可避免的引起再灌注损伤。细胞凋亡是脑缺血-再灌注损伤的主要发病机制之一,在该病变中起到决定性的作用。因此,对细胞凋亡的各个环节进行有效干预,可以为缺血性脑卒中提供新的治疗途径。Apelin-13是G蛋白偶联受体APJ的内源性配体,有研究证实Apelin-13能够抑制脑缺血-再灌注后的炎症反应,从而减轻大鼠局灶性脑缺血-再灌注损伤及脑水肿,然而Apelin-13是否可以通过抑制神经细胞凋亡来发挥神经保护作用,以及其可能的作用机制尚需进一步研究。目的研究侧脑室注射Apelin-13对大鼠脑缺血一再灌注损伤中神经细胞凋亡的影响,探讨其抑制细胞凋亡的作用机制,旨在为缺血性脑卒中的治疗提供新的实验依据。方法选用健康成年Wistar雄性大鼠,随机分为对照组、脑缺血-再灌注组和Apelin-13干预组。脑缺血-再灌注组和Apelin-13干预组给予大鼠禁食禁水12小时后,采用大脑中动脉阻塞(middle cerebral artery occlusion, MCAO)法制作大鼠脑缺血-再灌注模型,缺血1或2小时,再灌注24小时,Apelin-13干预组于再灌注后侧脑室注射Apelin-13。待大鼠再灌注24小时后进行神经功能缺损评分检测其行为学变化,并取材进行TTC (2,3,5-triphenyltetrazoliumchloride)染色检测大鼠脑梗死体积,TUNEL (TdT-mediated dUTP nick-end labeling)染色检测大鼠脑组织缺血半暗带(ischemia penumbra, IP)的神经细胞凋亡数量,免疫组织化学(immunohistochemistry, IHC)染色法检测大鼠脑组织缺血半暗带Bcl-2 (B cell lymphoma/leukemia 2)及Caspase-3 (cysteinyl aspartate-specificproteinase-3)的表达变化,蛋白免疫印迹(Western blot)技术检测大鼠大脑皮层、海马及丘脑组织YAP (yes-associated protein)的表达变化。结果1.行为学评分结果显示,侧脑室注射Apelin-13可改善缺血1小时再灌注24小时大鼠脑缺血-再灌注损伤所造成的神经功能缺损症状。2.TTC染色结果显示,侧脑室注射Apelin-13明显减少缺血1小时及2小时再灌注24小时大鼠的脑梗死体积。3. TUNEL染色结果显示,侧脑室注射Apelin-13明显减少缺血2小时再灌注24小时大鼠脑缺血半暗带的神经细胞凋亡数量。4.免疫组织化学染色结果显示,侧脑室注射Apelin-13后缺血2小时再灌注24小时大鼠脑缺血半暗带Bcl-2的表达上调,而Caspase-3的表达明显减少。5.蛋白免疫印迹结果显示,缺血1小时再灌注24小时大鼠脑组织皮层、海马及丘脑部位的YAP表达量较正常大鼠均有所增多,侧脑室注射Apelin-13后大鼠脑组织各部位YAP的表达水平上调。结论侧脑室注射Apelin-13能够抑制大鼠脑缺血-再灌注损伤后的神经细胞凋亡；Apelin-13的神经保护作用可能与上调抗凋亡因子及抑制促凋亡因子的表达相关；Hippo (YAP为该通路的主要元件)信号传导通路参与大鼠脑缺血-再灌注损伤及Apelin-13的神经保护作用。属性不符
【关键词】：Apelin-13 神经细胞凋亡 神经保护 脑缺血-再灌注 Hippo
【学位授予单位】：新乡医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R743.3
【目录】：

• 摘要5-7
• Abstract7-10
• 前言10-11
• 材料与方法11-27
• 结果27-32
• 讨论32-40
• 小结40-41
• 参考文献41-45
• 综述45-52
• 参考文献50-52
• 附录52-54
• 攻读学位期间发表文章情况54-55
• 致谢55-56
• 个人简历56

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前2条

1 马艳春;;脑缺血-再灌注损伤的研究进展[J];内蒙古医学杂志;2008年04期

2 陈莎,姚辉,艾洪武,游上游;足月新生儿缺氧缺血性脑病患儿脑脊液Na~+、游离Ca~(2+)含量的分析[J];检验医学;2005年03期

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本文编号：420437