Hsp22通过提高线粒体功能保护PINK1突变转基因果蝇的研究
本文关键词:Hsp22通过提高线粒体功能保护PINK1突变转基因果蝇的研究,,由笔耕文化传播整理发布。
【摘要】:目的:通过研究热休克蛋白22(Heat Shock Protein 22,Hsp22)对PINK1突变帕金森病(Parkinson′s Disease,PD)转基因果蝇的作用,明确Hsp22能否改善PINK1突变转基因果蝇的线粒体功能,探讨Hsp22是否通过线粒体氧化呼吸链Complex I的亚基ND42起保护作用。方法:本研究选用MHC-Gal4启动子特异性启动PINK1B9基因于果蝇肌肉组织中表达的PD转基因果蝇模型;运用Hsp22基因干预PINK1B9转基因果蝇,观察果蝇翅膀异常率、飞行率,鬼笔环肽染色显示间接飞行肌排列,电镜观察间接飞行肌结构和线粒体形态,检测线粒体ATP生成量、线粒体复合物Ⅰ活性,检测线粒体亚单位ND42、NDUFS3的表达水平。运用ND42 RNA干扰干预Hsp22干预组转基因果蝇,同样观察果蝇表型、间接飞行肌和线粒体形态,检测线粒体功能,探索Hsp22是否通过ND42起保护作用。结果:与对照组果蝇相比,PD转基因果蝇翅膀异常率高、飞行能力差,间接飞行肌不规则排列,肌纤维断裂,有空泡生成,线粒体膨胀,结构损伤,线粒体氧化磷酸化生成ATP功能降低,线粒体复合物Ⅰ活性下降;Hsp22干预PINK1B9转基因果蝇,能挽救其表型缺陷,改善线粒体结构和功能。ND42 RNAi干预Hsp22干预组转基因果蝇后,Hsp22的线粒体保护作用减弱。结论:Hsp22能保护PINK1突变转基因果蝇,改善线粒体功能障碍;ND42下调后,Hsp22对PINK1突变转基因果蝇的保护作用降低,推测Hsp22对线粒体功能的保护作用与ND42相关
【关键词】:转基因果蝇 PINK1突变 Hsp22 线粒体功能障碍 ND42
【学位授予单位】:桂林医学院
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2016
【分类号】:R742.5
【目录】:
- 中文摘要4-5
- ABSTRACT5-7
- 英汉缩略词对照表7-9
- 前言9-12
- 1 材料与方法12-19
- 1.1 果蝇品系12
- 1.2 主要试剂12-14
- 1.3 主要实验仪器14-15
- 1.4 试验方法15-19
- 2 结果19-25
- 2.1 Hsp22对PINK1突变转基因果蝇的保护作用19-23
- 2.2 Hsp22通过ND42提高PINK1突变转基因果蝇线粒体功能23-25
- 3 讨论25-28
- 3.1 线粒体功能障碍与PINK125-26
- 3.2 Hsp22对PINK1突变转基因果蝇的保护作用26-27
- 3.3 Hsp22通过提高线粒体功能保护PINK1突变转基因果蝇27-28
- 4 结论28-29
- 参考文献29-34
- 综述34-44
- 参考文献40-44
- 攻读学位期间发表的学术论文目录44-45
- 致谢45
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本文编号:432927
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