间充质干细胞来源的Exosome对神经损伤的保护作用

发布时间：2017-08-08 21:17

  本文关键词：间充质干细胞来源的Exosome对神经损伤的保护作用

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【摘要】：目的研究脂肪间充质干细胞(MSC)来源的Exosome对谷氨酸神经损伤的保护作用及可能机制。方法采用透射电镜和Western blot法检测人脂肪MSC来源的Exosome的特征,ELISA法检测Exosome中主要的细胞因子。用PC12细胞建立谷氨酸神经细胞损伤模型,并分为对照组(未经谷氨酸损伤的细胞)、Glu组(谷氨酸损伤未经其他处理的细胞)、Glu+Exo组(谷氨酸损伤后用100 ng/ml MSC Exosome处理的细胞)、Glu+Exo+Akt组(谷氨酸损伤后用MSC Exosome同时加10μmol/L Akt抑制剂LY294002处理的细胞)、Glu+Exo+Erk组(谷氨酸损伤后用MSC Exosome同时加10μmol/L Erk抑制剂U0126处理的细胞)和Glu+Exo+Trk B组(谷氨酸损伤后用MSC Exosome同时加10μmol/L Trk B抑制剂K252a处理的细胞),MTS法检测各组细胞的存活率并进行比较。结果透射电镜下可见Exosome为40~100 nm的小囊泡结构,Western blot法检测结果显示其可表达CD63、CD81、HSP70和HSP90等特征性蛋白。ELISA检测结果显示Exosome中主要包含的细胞因子为肝细胞生长因子和胰岛素样生长因子,含量分别为9336.49±258.63和58645.50±16014.62;而脑源性神经营养因子、血管内皮生长因子和神经生长因子含量均较低,分别为1928.25±385.47、1136.94±5.99和33.34±9.43。MTS检测结果显示,对照组、Glu组、Glu+Exo组、Glu+Exo+Akt组、Glu+Exo+Erk组和Glu+Exo+Trk B组的PC12细胞存活率分别为0.842±0.047、0.306±0.024、0.566±0.026、0.461±0.016、0.497±0.003和0.515±0.034,其中,Glu组显著低于对照组(P=0.02),Glu+Exo组显著高于Glu组(P=0.01),Glu+Exo+Akt组显著低于Glu+Exo组(P=0.01)。结论人脂肪MSC来源的Exosome具有保护谷氨酸神经损伤的作用,这可能是通过激活磷脂酰基醇3激酶-丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶信号通路来实现的。
【作者单位】： 中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院神经外科;中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所组织工程中心;
【关键词】： 间充质干细胞 Exosome 神经损伤 治疗机制
【基金】：国家自然科学基金(81371344)~~
【分类号】：R741
【正文快照】： Protection of Nerve Injury with Exosome Extracted from Mesenchymal Stem CellWEI Jun-ji1,CHEN Yun-fei2,XUE Chun-ling2,MA Bai-tao1,SHEN Ya-mei2,GUAN Jian1,BAO Xin-jie1,WU Hao1,HAN Qin2,WANG Ren-zhi1,ZHAO Chun-hua21Department of Neurosurgery,PUMC Hospital,C

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本文编号：642092