一种改良大鼠海马神经元原代培养的方法

发布时间：2017-08-12 03:35

  本文关键词：一种改良大鼠海马神经元原代培养的方法

  更多相关文章： 海马 神经元 原代细胞培养 方法 荧光免疫测定

【摘要】：目的为缺血性脑损伤模型的制备及研究建立一种更好的体外培养海马神经元的方法。方法实验组取出生24h内的Wistar新生鼠海马,用木瓜酶和DNA酶消化,以1×108/L的密度接种于含体积分数0.20胎牛血清的DMEM-F12培养液中,24h后更换无血清培养液,每隔3d半量换液。对照组采用传统的培养方法培养细胞。培养期间用倒置显微镜观察细胞形态及数量变化。采用免疫荧光法测定神经元特异性烯醇化酶表达,判断海马神经元培养是否成功。结果实验组的海马神经元培养12h,可见大部分细胞贴壁;培养24h,大部分细胞可见3~4个突起,突起长度为(25.0±2.5)μm;培养3d,神经元胞体增大,可见明显光晕;之后神经元分化逐渐成熟,胞体透亮,呈锥形或多极形,光晕明显,神经元之间的突起联系更加紧密,形成密集的神经细胞网络;培养13d后,神经元细胞开始退化、变性,胞体萎缩,神经细胞网络开始老化。随着培养天数的增加,神经元可出现少量凋亡,但实验组培养1、3、5、8d时的神经元数量明显高于对照组(t=11.5~49.5,P0.05)。免疫荧光法鉴定显示,实验组神经元细胞阳性率为(93.53±1.67)%。结论用上述改良方法培养得到的海马神经元细胞生长状态良好,可用于后续实验研究。
【作者单位】： 青岛大学附属医院麻醉科;青岛大学附属医院药剂科;青岛大学附属医院耳鼻咽喉科;
【关键词】： 海马 神经元 原代细胞培养 方法 荧光免疫测定
【基金】：国家自然科学基金项目(81371448)
【分类号】：R741
【正文快照】： 原代海马神经元的培养是体外研究神经系统疾病及制备相关模型的重要方法[1]。在中枢神经系统中,海马是一个重要脑区,它不仅有着复杂的生理功能,还与多种中枢神经系统疾病有关[2]。同时,海马是脑组织中对低氧最为敏感的区域,因此,原代培养海马神经元细胞适用于缺血性脑损伤模型

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 王旭明,陈坚,朱吉林,黄瀛,严进,陈宜张;血浆糖皮质激素升高条件下海马神经元的形态变化[J];解剖学杂志;1991年04期

2 黄凤玲;镁离子对谷氨酸诱发的海马神经元损伤的保护作用[J];中国应用生理学杂志;2002年04期

3 张建宁,孙红宇,杨树源,张卉,张文治;糖皮质激素对大鼠海马神经元影响的体外研究[J];中国神经精神疾病杂志;2003年03期

4 赵康仁,李学忠,田野,周旭平;半脑照射后早期海马神经元密度的研究[J];中国临床神经科学;2003年03期

5 秦海宏,沈慧,王福O，

本文编号：659609