酪氨酸激酶2（DDR2）和血管内皮细胞生长因子（VEGF）在脑胶质瘤中的表达及相关性研究

发布时间：2017-08-23 09:42

  本文关键词：酪氨酸激酶2（DDR2）和血管内皮细胞生长因子（VEGF）在脑胶质瘤中的表达及相关性研究

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【摘要】：目的:通过对不同级别脑胶质瘤组织及正常脑组织中的酪氨酸激酶2及血管内皮细胞生长因子蛋白表达含量的测定,探讨胶质瘤中酪氨酸激酶2和血管内皮细胞生长因子在脑胶质瘤中的表达意义及两者的相关性。方法:收集自2013年5月-2014年10月河北医科大学第二医院神经外科脑胶质瘤组织标本85例,其中WHO分级I级脑胶质瘤14例,II级脑胶质瘤27例,III级脑胶质瘤25例,IV级脑胶质瘤19例。所取病例标本病理诊断均由河北医科大学第二医院病理科按照WHO脑肿瘤分级诊断标准进行。正常脑组织标本取自因脑外伤或者脑出血患者需做颅内减压术所取的脑组织标本,共取15例作为对照组。本实验所取脑胶质瘤病理均为入院后初次诊断,手术前均未经过任何放化疗等抗肿瘤治疗。所有实验用标本,均于术中切下病理组织后立即取材,10%的福尔马林固定及液氮罐-80℃保存。将以上标本分为五组:正常脑组织组,I级胶质瘤组,II级胶质瘤组,III级胶质瘤组,IV级胶质瘤组。采用免疫组织化学方法检测VEGF和DDR2在上述五组病理组织切片中的表达情况,并用统计软件SPSS13.0分析其表达特点及相关性,采用免疫荧光法检测VEGF和DDR2在同一切片中表达情况并观测两种因子表达特点。应用Western Blot法同测定上述五组标本VEGF和DDR2的蛋白条带,并应用相关软件检测五组条带的灰度值,应用SPSS13.0进行统计分析。结果:1免疫组化果显示:VEGF在正常脑组织、I级脑胶质瘤、II级脑胶质瘤、III级脑胶质瘤、IV级脑胶质瘤表达阳性率分别为6.67%、71.43%、88.89%、100.00%、100.00%,随着肿瘤恶性程度增高,VEGF表达量增加,Spearman等级相关得出相关系数r=0.698,P0.01,VEGF表达与肿瘤分级呈正相关,即肿瘤分级越高,VEGF表达阳性率越高,图片见:Fig1。统计图表详见Table 1、Table 3;2免疫组化结果显示:DDR2在正常脑组织、I级脑胶质瘤、II级脑胶质瘤、III级脑胶质瘤、IV级脑胶质瘤表达阳性率分别为33.33%、78.57%、88.89%、96.00%、100.00%,随着肿瘤恶性程度增高,DDR2表达量增加,Spearman等级相关得出相关系数r=0.588,P0.01,DDR2表达与肿瘤分级呈正相关,即肿瘤分级越高,DDR2表达阳性率越高。图片见:Fig2详见Table 2、Table 4;3对VEGF、DDR2的表达情况进行相关性分析。Spearman等级相关得出相关系数r=0.928,P0.01,即VEGF表达与DDR2表达呈高度正相关,即VEGF表达阳性等级越高,DDR2表达阳性等级越高,详见Table 5;4采用免疫荧光双标法观察同一病理组织中两种因子分布情况。红色荧光为VEGF因子,绿色荧光为DDR2因子,蓝色荧光为细胞核。可见在同一组织中两种因子的分布有聚集性。详见Fig3、Fig4、Fig5;5蛋白含量:采用western blot方法对标本的蛋白含量进行测定。观察DDR2、VEGF及action在正常脑组织、I级脑胶质瘤、II级脑胶质瘤、III级脑胶质瘤、IV级脑胶质瘤中的蛋白表达情况,结果以测定的灰度值为准。分析VEGF、DDR2的相对表达量,VEGF的相对表达量逐渐升高,DDR2的相对表达量逐渐增高。各级别脑胶质瘤组分别与正常脑组织组向比较,采用单因素方差分析。结果以均数±标准差表示,P0.05,均有统计学意义。详见Table 6、Fig 6、Fig 7、Fig 8。结论:1与正常脑组织的对照组相比,各脑胶质瘤组中的DDR2表达及VEGF表达明显增高,且随着脑胶质瘤的级别增加表达增高越明显,存在显著性差异(P0.01)。2与正常脑组织的对照组相比,各脑胶质瘤组中的DDR2及VEGF蛋白含量明显增高,且随着脑胶质瘤级别增高,两种因子所表达的蛋白表达越高。蛋白表达与脑胶质瘤级别存在正相关性。提示肿瘤的恶性水平在一定程度上可以影响着DDR2的蛋白含量的表达。3在免疫荧光图片中可以见到,在多组标本中,DDR2蛋白表达部位与VEGF蛋白表达部位是重合的。结合统计学分析结果,DDR2与VEGF存在一定的相关性。4通过对正常脑组织及不同级别脑胶质瘤组内免疫组化结果进行Spearman等级相关性分析,P0.01,VEGF表达与DDR2表达呈高度正相关。
【关键词】：人脑胶质瘤 DDR2 VEGF 免疫组化 Western blot
【学位授予单位】：河北医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R739.4
【目录】：

• 中文摘要4-7
• 英文摘要7-11
• 英文缩写11-12
• 前言12-13
• 材料与方法13-23
• 结果23-25
• 附图25-33
• 附表33-37
• 讨论37-40
• 结论40-41
• 参考文献41-43
• 综述DDR2 和VEGF在脑胶质瘤中的表达及意义及相关性43-53
• 参考文献49-53
• 致谢53-54
• 个人简历54

【参考文献】

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1 姜华;孙成法;褚荣涛;叶凯;黄炜;赵富文;丘佳明;王君祥;;人脑胶质瘤MMP2/TIMP2与肿瘤血管的相关性分析[J];临床神经外科杂志;2014年06期

2 段泽星;谢立群;;VEGF在肿瘤生长和血管生成中的作用[J];世界华人消化杂志;2010年27期

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本文编号：724355