离子交换整体柱的构筑及固相萃取血清中抗癫痫药物的研究

发布时间：2017-08-23 10:32

  本文关键词：离子交换整体柱的构筑及固相萃取血清中抗癫痫药物的研究

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【摘要】：目的对于血清中抗癫痫药物的测定,在进行色谱分析之前,往往需要通过适当的前处理去除杂质,浓缩目标物。固相萃取由于操作简便、有机溶剂用量少、富集净化效果好、易与现代分析仪器联用等特点,成为当今发展最为迅速的样品前处理方法,但商品化的固相萃取柱成本较高,难以重复使用。本论文旨在构筑一种可以重复使用的离子交换整体柱,作为固相萃取吸附剂,结合高效液相色谱(HPLC),建立血清中抗癫痫药物的分析测定方法。方法1通过原位聚合法制备离子交换聚(2-丙烯酰胺-2-甲基-1-丙磺酸-乙二醇二甲基丙烯酸酯)(poly(AMPS-co-EDMA))(50 mm×2.1 mm,id)整体柱,考察单体的用量(69~137 mg)、反应温度(55~70℃)和反应时间(4~20 h)对整体柱性能的影响,并从压力、机械强度、保留因子、表面形貌等方面对整体柱进行表征。2将最优条件下制得的poly(AMPS-co-EDMA)整体柱作为固相萃取吸附剂,用于血清中卡马西平、苯巴比妥、苯妥英钠、奥卡西平代谢产物10,11-二氢-10-羟基卡马西平等抗癫痫药物及其代谢产物测定的前处理。实验考察了上样流动相种类(纯水、磷酸二氢钠缓冲盐)、上样流速(0.1 m L/min、0.3 m L/min、0.5m L/min)、洗脱流动相种类(甲醇、乙腈)、洗脱体积(1.0~4.0 m L)、分离流动相乙腈-磷酸二氢钠缓冲盐比例(v/v,55:45、50:50、45:55、40:60、35:65)、缓冲盐浓度(5~20 mmol/L)及缓冲盐的p H值(3.5、4.5、5.5、6.5)等因素。3在优化的实验条件下,对方法的特异性、检出限、定量限、线性范围和回收率等指标进行评价。此外,通过同一根poly(AMPS-co-EDMA)整体柱不同使用次数,以及相同批次和不同批次合成的整体柱对血清中抗癫痫药物卡马西平的固相萃取得到的色谱峰峰面积计算相对标准偏差,评价该吸附剂的使用寿命和重现性。结果1实验表明,随着反应时间的增长和反应温度的提高,poly(AMPS-coEDMA)整体柱的柱压及对目标物的保留时间呈规律性的变化。实验最终选择整体柱的合成条件为65℃水浴反应16 h,合成的整体柱柱床结构均匀、连续多孔、通透性好。2将poly(AMPS-co-EDMA)整体柱作为固相萃取吸附剂,结合高效液相色谱法对血清中抗癫痫药物进行分析测定。方法使用纯水上样,上样流速为0.1m L/min,以甲醇为洗脱流动相,在洗脱体积为2.0 m L的条件下洗脱,进行液相色谱分析。3方法的线性范围为0.5~80.0mg/m L,检出限为0.04mg/m L,定量限为0.13mg/m L。卡马西平、苯巴比妥、苯妥英钠及10-羟基卡马西平在1.5、20.0、50.0mg/m L三个添加水平下的加标回收率为83.1%~102.9%,日内和日间相对标准偏差￡5.33%。同一根整体柱第1次、第100次和第150次使用,卡马西平色谱峰峰面积的相对标准偏差为4.73%。使用相同批次和不同批次合成的poly(AMPSco-EDMA)整体柱,得到卡马西平色谱峰峰面积的相对标准偏差分别为5.26%和6.91%。结论基于2-丙烯酰胺-2-甲基-1-丙磺酸的离子交换整体柱固相萃取,结合高效液相色谱分析测定血清中卡马西平、苯巴比妥、苯妥英钠、10,11-二氢-10-羟基卡马西平的方法,能够满足血清中抗癫痫药物的常规分析测定要求。离子交换整体柱作为前处理吸附剂,制备方法简单,结构连续多孔,比表面积大,通透性好,生物兼容性良好,重复使用次数不低于150次,能极大的降低成本。
【关键词】：离子交换整体柱 固相萃取 抗癫痫药物 血清 高效液相色谱
【学位授予单位】：华北理工大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R742.1
【目录】：

• 摘要4-6
• Abstract6-10
• 引言10-13
• 第1章 实验研究13-34
• 1.1 材料与方法13-16
• 1.1.1 主要试剂和材料13-14
• 1.1.2 样品制备14
• 1.1.3 Poly（AMPS-co-EDMA）整体柱的制备14-15
• 1.1.4 Poly（AMPS-co-EDMA）整体柱固相萃取和HPLC分析测定15
• 1.1.5 方法验证15-16
• 1.2 结果16-27
• 1.2.1 Poly（AMPS-co-EDMA）整体柱的构筑和表征16-18
• 1.2.2 Poly（AMPS-co-EDMA）整体柱固相萃取条件优化18-22
• 1.2.3 HPLC分离分析条件优化22-24
• 1.2.4 方法验证24-27
• 1.3 讨论27-30
• 1.3.1 Poly（AMPS-co-EDMA）整体柱的构筑27-28
• 1.3.2 Poly（AMPS-co-EDMA）整体柱固相萃取考察28
• 1.3.3 文献方法与实验方法对比28-30
• 1.4 小结30
• 参考文献30-34
• 第2章 综述 血液样品预处理技术及整体柱固相萃取在血药浓度监测领域的应用34-49
• 2.1 前言34-35
• 2.2 血液样品预处理35-41
• 2.2.1 蛋白沉淀法35-36
• 2.2.2 液-液萃取法36-37
• 2.2.3 超临界流体萃取37-38
• 2.2.4 微透析38-39
• 2.2.5 固相萃取法39-41
• 2.3 整体柱41-44
• 2.3.1 整体柱分类41-43
• 2.3.2 整体柱固相萃取在血药浓度监测领域的应用43-44
• 2.4 展望44
• 参考文献44-49
• 结论49-50
• 致谢50-51
• 导师简介51-52
• 作者简介52-53
• 学位论文数据集53

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本文编号：724537