氨基胍在自发性蛛网膜下腔出血后早期脑损伤中作用的研究

发布时间：2017-09-08 11:39

  本文关键词：氨基胍在自发性蛛网膜下腔出血后早期脑损伤中作用的研究

  更多相关文章： 蛛网膜下腔出血 早期脑损伤 氨基胍 iNOS NSE

【摘要】：目的:近期研究表明早期脑损伤是造成蛛网膜下腔出血患者预后差的主要原因,本研究初步探讨氨基胍在蛛网膜下腔出血后早期脑损伤中起的作用。方法:雄性SD大鼠168只,按照随机数字法分为对照组(Control组)、假手术组(Sham组)、实验组(SAH组)、干预组(SAH+AG组),每组42只;各组又分为1h、3h、6h、12h、24h、48h、72h 7个亚组,每亚组6只。视交叉前池注血法建立大鼠蛛网膜下腔出血模型,HE染色鉴定模型。参考Garcia法进行神经行为学评分,TUNEL法检测神经元凋亡程度,电镜进一步观察神经元超微结构的改变,Western-Blot法检测NSE蛋白、i NOS蛋白的表达情况。结果:HE染色后,在光学显微镜下进行观察,发现与对照组相比,实验组模型蛛网膜下腔存在较多红细胞。实验组大鼠组内各个时间点的神经行为学评分结果呈一定的趋势:自6h开始下降,24h-48h达到最低,随后上升。使用氨基胍进行干预后,12h、24h、48h时间点大鼠的神经功能结果得到了明显的改善(P0.01)。TUNEL法检测表明实验组显现出时相性变化,自6h起阳性细胞率开始增加,24h达到高峰,48h开始逐渐下降;使用氨基胍干预后,12h、24h、48h阳性细胞率明显降低(P0.01)。电镜下观察到不同组别、不同时间点神经元超微结构的变化情况。Western-blot法检测表明实验组NSE 6h开始逐渐上升,24h时间点表达最高,48h开始逐渐下降。氨基胍干预后,6h、12h、24h、48h、72h NSE的表达明显降低(P0.01)。对照组i NOS未见表达;实验组i NOS自6小时开始增高,24h表达最高;氨基胍干预后,6h、12h、24h、48h、72h的i NOS表达明显降低(P0.01)。实验组NSE Western-Blot蛋白表达量与TUNEL染色阳性细胞率呈正相关(r=0.902,P0.01),实验组i NOS Western-Blot蛋白表达量与TUNEL染色阳性细胞率呈正相关(r=0.748,P0.01)。结论:蛛网膜下腔出血后早期脑损伤中氨基胍改善了SD大鼠神经行为学功能,抑制了神经元凋亡,下调i NOS、NSE的表达,起到了减轻早期脑损伤的作用。
【关键词】：蛛网膜下腔出血 早期脑损伤 氨基胍 iNOS NSE
【学位授予单位】：石河子大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R743.35
【目录】：

• 摘要5-6
• Abstract6-9
• 英文缩略词9-10
• 第一章 引言10-12
• 第二章 实验材料与试剂配制12-15
• 2.1 实验材料12-13
• 2.1.1 实验动物12
• 2.1.2 主要试剂以及设备12-13
• 2.2 主要使用试剂配制13-15
• 第三章 实验方法15-21
• 3.1 实验路线图15
• 3.2 实验动物分组15
• 3.3 动物模型建立15-16
• 3.4 HE染色鉴定模型16
• 3.4.1 取材16
• 3.4.2 制备石蜡切片16
• 3.4.3 HE染色16
• 3.5 神经行为学评分16-17
• 3.6 TUNEL检测细胞凋亡情况17
• 3.7 电镜观察神经元超微结构变化情况17-18
• 3.8 Western-Blot检测蛋白表达水平18-20
• 3.8.1 提取蛋白18
• 3.8.2 清洗玻璃板及胶架18
• 3.8.3 制胶18-19
• 3.8.4 蛋白上样及电泳19
• 3.8.5 转膜19-20
• 3.8.6 封闭20
• 3.8.7 一抗孵育20
• 3.8.8 二抗孵育20
• 3.8.9 曝光20
• 3.8.10 western-blot图像分析20
• 3.9 统计学分析20-21
• 第4章 实验结果21-30
• 4.1 SD大鼠模型的建立及HE染色鉴定21
• 4.2 大鼠神经行为学评分结果21-22
• 4.3 TUNEL法检测细胞凋亡情况22-24
• 4.4 电镜下观察神经元超微结构变化24-26
• 4.5 Western-Blot法检测蛋白表达26-30
• 4.5.1 Western-Blot法检测NSE蛋白表达26-27
• 4.5.2 Western-Blot法检测iNOS蛋白表达27-29
• 4.5.3 NSE与iNOS表达量与凋亡之间的相关性分析29-30
• 第五章 讨论30-35
• 5.1 有关蛛网膜下腔出血后早期脑损伤的概述30
• 5.2 NO、iNOS、NSE与蛛网膜下腔出血后早期脑损伤的关系30-32
• 5.3 实验模型的选择32
• 5.4 氨基胍在SAH大鼠早期脑损伤中的保护作用32-35
• 第六章 结论35-36
• 参考文献36-40
• 综述40-44
• 参考文献42-44
• 致谢44-45
• 作者简介45-46
• 导师评阅表46

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 符丽娟,王洪新,庞东渤,李艳芹,周庆峰;氨基胍对实验性糖尿病大鼠心肌的保护作用[J];中国药理学通报;2004年08期

2 付四海,熊燕,付云峰,郭征;氨基胍对糖基化蛋白损伤大鼠血管内皮功能的影响[J];中国药理学通报;2003年07期

3 葛奎,陆树良,青春;氨基胍与糖尿病的创面难愈性[J];中华医学杂志;2004年11期

4 李强翔,文格波,文芳,李峗,段世芳,宓宝斌,邓学军;氨基胍和维生素C对糖尿病肾病大鼠血清Ⅳ型胶原的影响[J];南华大学学报(医学版);2005年02期

5 吕学爱;王青;亓春花;;氨基胍对实验性糖尿病肾病的保护作用[J];泰山医学院学报;2006年01期

6 明义;李兆欣;逄力男;刘长山;刘海霞;王秀军;;氨基胍对糖尿病大鼠非酶糖化和细胞凋亡的影响[J];中国实用医药;2010年08期

7 陈及非;阎作勤;龙作林;;氨基胍对兔脊髓缺血再灌注损伤的保护作用[J];中国临床医学;2010年05期

8 李兴源;刘长山;魏进;王秀军;;氨基胍、牛蒡对糖尿病大鼠肾脏组织非酶糖化和细胞凋亡的影响[J];临床合理用药杂志;2011年05期

9 曾根博仁,李曼;氨基胍[J];日本医学介绍;1997年08期

10 安淑华,郭春宝,郑华城,孙国志,李静满;氨基胍在新生大鼠缺氧缺血性脑损伤中的作用[J];中华儿科杂志;2000年11期

中国重要会议论文全文数据库 前9条

1 付四海;熊燕;付云峰;;氨基胍对糖基化白蛋白损伤大鼠离体胸主动脉内皮的保护作用[A];湖南省生理科学会新世纪学术年会论文摘要汇编[C];2002年

2 汤旭磊;王存福;;糖尿病大鼠的肝脏损害与氨基胍的保护作用[A];2008内分泌代谢性疾病系列研讨会暨中青年英文论坛论文汇编[C];2008年

3 范涤;;氨基胍在大鼠外科脑损伤模型中的脑保护作用[A];2011中华医学会神经外科学学术会议论文汇编[C];2011年

4 卢子杰;顾晓箭;张亚大;张平;徐彦;朱清毅;黄卫周;;氨基胍对糖尿病性阴茎勃起功能障碍大鼠阴茎动脉超微结构的影响[A];第五次全国中西医结合泌尿外科学术会议论文汇编[C];2005年

5 王培昌;苏英;张建;张宗玉;童坦君;;氨基胍延缓2BS细胞复制性衰老的实验研究[A];第五次全国中青年检验医学学术会议论文汇编[C];2006年

6 饶子亮;潘甜美;王修银;王刚;黄小琼;;氨基胍对STZ模型小鼠学习记忆能力及抗氧化作用的研究[A];中国实验动物学会第七届学术年会论文集[C];2006年

7 吕学爱;关广聚;孙云;李学刚;柳刚;涂晓文;;氨基胍对糖尿病大鼠肾脏蛋白激酶C活性的影响[A];“中华医学会肾脏病学分会2004年年会”暨“第二届全国中青年肾脏病学术会议”论文汇编[C];2004年

8 赵伟;张宏;方佩华;王瑞琳;朱梦瑜;管乐;徐延光;张鹏;;DM大鼠甲状腺组织超微结构的病理变化及胰岛素、氨基胍干预的实验研究[A];2008内分泌代谢性疾病系列研讨会暨中青年英文论坛论文汇编[C];2008年

9 张宏;吴晓明;赵伟;王瑞青;郑凝;方佩华;;氨基胍对糖尿病大鼠甲状腺RAGE、NIS、TSHR蛋白表达干预的试验研究[A];2008中国医师协会内分泌代谢科医师分会年会论文汇编[C];2008年

中国重要报纸全文数据库 前2条

1 ;川芎嗪联合氨基胍对糖尿病肾病有治疗作用[N];中国中医药报;2004年

2 本版文字 王丹;糖 想说爱你不容易[N];健康报;2008年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 杨鹏;氨基胍在自发性蛛网膜下腔出血后早期脑损伤中作用的研究[D];石河子大学;2016年

2 陈及非;诱导型一氧化氮合酶抑制剂氨基胍在兔脊髓缺血再灌注损伤中的作用研究[D];复旦大学;2008年

3 李光达;糖尿病视网膜病变神经细胞凋亡及氨基胍对其影响的研究[D];青岛大学;2005年

4 李强翔;氨基胍和维生素C对糖尿病大鼠血管的保护作用及其机制探讨[D];南华大学;2005年

5 武宏敏;氨基胍对心肌缺血再灌注损伤的影响[D];河北医科大学;2008年

6 仝巧云;慢性应激大鼠结肠形态学变化及氨基胍的保护作用[D];武汉大学;2005年

7 张红;氨基胍联合川芎嗪治疗2型糖尿病的实验研究[D];山东大学;2006年

8 冯帆;白藜芦醇与氨基胍对糖尿病大鼠肾脏的保护作用[D];兰州大学;2007年

9 赵彦武;糖基氨基胍及胍基吡唑醛腙的合成[D];新疆大学;2008年

10 张新艳;氨基胍对大鼠急性心肌缺血损伤的影响[D];河北医科大学;2011年

，

本文编号：813819