土贝母苷甲诱导人神经胶质瘤U251细胞凋亡及其潜在机制的研究

发布时间：2017-09-15 07:36

  本文关键词：土贝母苷甲诱导人神经胶质瘤U251细胞凋亡及其潜在机制的研究

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【摘要】：目的:土贝母是我国一种传统的中草药,具有广泛的用途,土贝母苷甲(TBMS I)是从土贝母中分离纯化出的一种天然化合物。本实验以神经胶质瘤U251细胞为模型,初步探究土贝母苷甲在体外的抗胶质瘤作用及其潜在机制。方法:我们运用MTT法检测不同浓度的TBMS I对神经胶质瘤细胞增殖的影响。通过倒置荧光显微镜来观察细胞核形态学的变化。运用流式细胞仪分析TBMS I对神经胶质瘤细胞凋亡的影响以及检测细胞内活性氧(ROS)的水平。实时荧光定量PCR技术检测mi R-21以及PDCD4基因水平的变化。Western blot法分析相关蛋白表达水平的变化。结果:TBMS I以剂量和时间依赖方式抑制神经胶质瘤U251细胞的增殖。TBMS I处理24h后,通过Hoechst 33258染色法,我们观察到U251细胞出现了细胞核浓染、核碎裂、凋亡小体形成等凋亡形态学改变。流式细胞仪检测显示,TBMS I以剂量依赖方式诱导神经胶质瘤U251细胞凋亡。Western blot结果提示,TBMS I通过上调FADD、caspase-8、caspase-3、Bax的表达以及下调Bcl-2的表达诱导U251细胞凋亡。此外,我们还发现,TBMS I能够导致细胞中活性氧(ROS)生成增加,从而促进细胞色素C(Cytochrome C)的释放以及Caspase-3的活化,进而诱导神经胶质瘤U251细胞凋亡。PCR结果显示,TBMS I作用于U251细胞后,mi R-21的水平逐渐降低,而PDCD4基因的水平显著增加。Western blot结果也表明,随着TBMS I浓度的增加,PDCD4蛋白的表达水平显著上调。结论:TBMS I能够显著抑制人胶质瘤U251细胞的增殖并诱导细胞发生凋亡。我们的研究结果提示TBMS I可能在神经胶质瘤治疗方面具备广阔的应用前景。
【关键词】：土贝母苷甲 神经胶质瘤 增殖 凋亡
【学位授予单位】：苏州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R739.41
【目录】：

• 中文摘要4-5
• Abstract5-8
• 前言8-9
• 材料与方法9-21
• 结果21-28
• 讨论28-32
• 结论32-33
• 参考文献33-37
• 综述37-47
• 参考文献42-47
• 缩略词表47-48
• 攻读学位期间公开发表的论文48-49
• 致谢49-50

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前5条

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本文编号：855186