自制脂质纳米泡用于体内外超声造影显像及介导细胞基因转染的实验研究

发布时间：2017-12-14 16:06

  本文关键词：自制脂质纳米泡用于体内外超声造影显像及介导细胞基因转染的实验研究

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【摘要】：目的观察自制阳离子纳米泡作为基因转染载体体外转染肝癌细胞系HepG2细胞的可行性。 方法将脂质体、聚乙烯亚胺（PEI）和全氟丙烷声震后制得壳膜带有PEI的阳离子脂质体纳米泡（PNB），评价其基本特性，用其转染HepG2细胞，并辐照超声，荧光显微镜观察绿色荧光蛋白表达情况，流式细胞仪检测细胞转染率，CCK-8法评估其细胞活性。 结果制备的PNB表面带有正电荷，能够阻碍质粒DNA在电场作用下发生迁移，且能够有效地转染HepG2细胞，转染效率达30%-45%，辐照超声后转染效率明显提高(P＜0.05)。 结论新型阳离子纳米泡在体外可作为基因转染载体，有效地携带质粒DNA并促进转染，辐照超声可使转染效率显著提高。 目的探讨自制脂质纳米泡体内外超声造影增强显影效果。 方法通过反相蒸发法制备脂质体并用声震法制得脂质纳米泡，对其粒径大小、形态、zeta电位等进行检测。将纳米泡/常规造影剂（SonoVue）均分别按照壳膜质量浓度和气泡浓度稀释成相同浓度后观察二者的体外显像效果差异。纳米泡/SonoVue用同等气泡浓度对裸小鼠肝脏及皮下移植瘤行超声造影成像，对比造影效果。 结果所制备的纳米泡大小均一性好，无明显聚集，平均粒径为（424.46±89.32）nm，浓度为（6.0～9.0）×109个/ml。在相同的壳膜质量浓度下自制纳米泡显影强度明显高于SonoVue，差别有统计学意义（p＜0.01）。脂质纳米泡和SonoVue都能达到较好的体外显影效果，各相同气泡浓度组的纳米泡与SonoVue增强显影强度间差别无统计学意义（p＞0.05）。裸小鼠尾静脉注射后能够显著增强其肝脏和皮下移植瘤显影，与SonoVue相比达峰时间延迟，显影时间显著延长。 结论本研究成功制备了纳米级超声微泡造影剂，脂质原材料利用率高，在体外及裸鼠肝脏和皮下移植瘤均具有较好增强显影效果，，显影时间较常规超声微泡造影剂明显延长，为下一步脂质纳米泡在肿瘤的显像和治疗中的应用提供了实验依据。
【学位授予单位】：华中科技大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R318.08

【参考文献】

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3 张清凤;王志刚;李攀;郑元义;田菊;王星;;超声联合阳离子微泡造影剂体外增强基因转染[J];中国医学影像技术;2012年02期

本文编号：1288498