BMMSCs生物学性能及与脊髓修复材料的生物作用

发布时间：2019-08-16 17:47

【摘要】：本文以大鼠骨髓间充质干细胞为细胞基础,对脊髓损伤修复支架材料IKVAV接枝聚乳酸/聚乙二醇水凝胶进行初步的细胞学研究,通过细胞和材料的共培养进行细胞增殖、细胞周期、细胞毒性和细胞粘附性等实验,对材料的细胞相容性进行评价。主要研究结果如下：全骨髓贴壁法分离和培养大鼠骨髓间充质干细胞,通过频繁换液以及控制消化时间对细胞进行纯化培养,细胞从第三代开始呈现比较均一的细胞形态,说明细胞纯度得到了提高；进行细胞生长曲线绘制、细胞周期测定、克隆形成集落实验以及诱导成骨成脂实验对BMMSCs的生物学性能进行初步探讨。实验结果表明,分离培养出来的细胞形态比较均一、纯度较高、增殖能力旺盛以及具有多向分化潜能,是骨髓间充质干细胞。在五种浓度(2mM,1mM,0.5mM,0.1mM和0.02mM) IKVAV多肽预包被的培养板中培养BMMSCs,24h的粘附率试验结果表明：浓度为0.1mM的多肽浓度最适合细胞的粘附；五种浓度多肽对细胞的增殖影响实验结果显示：0.1mM多肽组OD值大于其它组,对细胞增殖的促进作用较为明显,对细胞活力影响显著；流式细胞仪对五种浓度多肽作用下细胞周期检测的结果显示：0.1mM多肽组细胞的S期的比例为32.29%,增殖情况强于其它组。上述实验结果表明：IKVAV多肽在不同程度上可以促进细胞更快的贴壁和增殖。倒置显微镜下观察水凝胶材料与BMMSCs的三维培养情况,发现细胞在接枝IKVAV水凝胶中均匀的生长,形态多呈长梭形铺展开；细胞在未接枝IKVAV的水凝胶中细胞较为稀疏,形态多为圆形,粘附性不是很好。场发射扫描电镜观察发现细胞能很好的粘附于接枝IKVAV的水凝胶材料表面以及凝胶孔洞中,而几乎没有细胞粘附在未接枝多肽的水凝胶上。说明接枝IKVAV多肽的水凝胶具有较好的生物活性,适合用于脊髓修复的支架材料。
【学位授予单位】：武汉理工大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2012
【分类号】：R318.08

【参考文献】