蜣螂疏水壳聚糖的止血作用及其机制初探

发布时间：2020-09-09 14:34

　　 研究背景据统计每年各类伤害发生上亿次,而失血过多则是导致受创致死的最主要因素,因此,受创后急救止血是治疗的关键。传统急救止血材料如普通纱布、止血带或绷带等,止血效果有限,难以适应复杂出血的情况,急需更加灵活、简便高效的止血材料。受创后止血过程最早的反应程序是血管收缩,从而减慢血流,促进凝血及止血。止血材料要起作用,通常是聚集血小板和激活凝血系统来实现,但目前还没有一种能够完全满足作为理想急救止血剂的材料。壳聚糖由于其优越的生物相容性、可降解性、安全性,以及兼具抗菌特性和成本低廉等特点,是一种最具潜力的可不断开发的急救止血剂。研究目的从蜣螂疏水壳聚糖的制备与表征、止血效果考察和机制探究三方面揭示其作为止血材料的可行性,并探究影响其止血的因素,为新型止血材料的开发提供实验依据。研究方法采用实验室自主专利技术提取制备蜣螂疏水壳聚糖,对制备产物进行表征,通过元素分析仪和接触角等仪器进行理化分析,以红外光谱仪和核磁波谱仪对其进行结构分析,以CCK8和流式细胞仪对其进行生物学评价。采用血液凝集和止血实验研究蜣螂疏水壳聚糖的止血功效,再以此为基础进一步研究其与血液中主要成分如红细胞、核酸、蛋白和无机盐等成分之间的作用关系,从而初步探明凝血机制。结果和结论蜣螂壳聚糖提取产率约为17.27%,蜣螂疏水壳聚糖改性产率约为91.54%。蜣螂疏水壳聚糖与疏水市售壳聚糖相比,溶解性好,黏度低,取代度高。接触角、红外、核磁结果显示合成了疏水壳聚糖。生物学评价结果显示,蜣螂疏水壳聚糖对细胞无毒性作用;血液凝集与小鼠凝血实验表明,蜣螂疏水壳聚糖具有优良的止血作用;止血机制探究表明,蜣螂疏水壳聚糖与细胞膜上的物质有着某种作用,能富集细胞,改变细胞膜的通透性,从而牢固链接各个细胞。核酸和蛋白与蜣螂疏水壳聚糖之间均无凝集作用,而无机盐离子与蜣螂疏水壳聚糖之间存在牢固的离子键合作用,能形成离子凝胶。因此,推断蜣螂疏水壳聚糖能与血液中的血细胞和无机盐作用形成血凝块而止血,而非依赖瀑布凝血机制。
【学位单位】：西南科技大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2019
【中图分类】：O636.1;R318.08
【部分图文】：

图 3-1 接触角测试结果由图 3-1 的结果可知，纯水与 CCS 的接触角为 49.35°，纯水与 CS 的接触角为67.26°，纯水与 CHMC 的接触角为 91.51°，纯水与 HMC 的接触角为 104.46°，疏水改性前后差异极其显著，表明合成了疏水产物，且产物的疏水性较强。从实验结果也发现，HMC 的疏水性比 CHMC 强，这与溶解性实验结果一致。3.2.2 结构表征3.2.2.1 红外分析4000 3000 2000 1000 0CSHMCC-CSC-HMC138816211670289429333459

图 3-3 核磁图谱如图 3-3 所示，在δ=1.08 左右出现了-CH3对应的三重质子峰，δ=1.18 左右出现的质子峰，其中亚甲基的峰面积明显大于甲基的峰面积，说明有烷基长链的.90 左右出现了羟基和氨基的质子峰。该实验结果与红外光谱的测定结果一致应发生在壳聚糖的氨基上，且生成了疏水壳聚糖。3.2.3 生物学表征3.2.3.1 CCK8 实验0.60.81.01.21.4lviabilityCCSCSCHMCHMC

空白对照 CCSCS图 3-6 细胞凋亡流式检测图100500024Apoptoticrate(%)Concentration(ug/ml)CKCCSCSCHMCHMC

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本文编号：2815095