氧化铈纳米颗粒对CD8 + T细胞功能的影响及其代谢产物对骨骼系统的潜在风险研究
发布时间：2021-02-07 22:46
背景:当机体遭到病原体入侵或自身病变时,抗原递呈细胞（Antigen presenting cell,APC）会摄取加工抗原并将它呈递到次级淋巴器官然后激活淋巴细胞。淋巴细胞中的CD4+T细胞主要起到募集白细胞和调节免疫反应的作用,而CD8+T细胞对杀伤病原体起到了直接的效应功能。细胞毒性CD8+T细胞（Cytotoxic CD8+T cells,CTLs）是处于激活状态的na?ve CD8+T细胞,作为一种特异性T细胞,它会分泌多种细胞因子和细胞效应分子参与免疫作用,在清除细胞内病原体和肿瘤细胞的过程中起到了重要的作用。氧化铈纳米颗粒（Ceria nanoparticles,CNPs）由于具有多种酶活性而被广泛应用于生物医学领域并在很多系统疾病的治疗中起到了重要作用。以往的研究主要将纳米颗粒作为药物递送或是抗原递送的载体,因此更多和免疫相关的研究都集中在了CD4+T细胞或是树突状细胞（Dendritic cell,DC）、巨噬细胞等抗原递呈细胞,忽视了纳米颗粒本身对于机体的作...
【文章来源】：中国人民解放军陆军军医大学重庆市
【文章页数】：76 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
CNPs的合成与表征
图 2-3 CNPs 对 CD8+T 细胞的增殖没有影响。（A）（B）Ki67 染色 CD8+T 细胞的点统计结果图；（C）CFSE 染色 CD8+T 细胞荧光分布图，数字代表细胞分裂代数。图中均数±标准差，显著性差异表示为 ns（p>0.05），每组 n=3。2.2.3 CNPs 促进了细胞因子分泌和细胞效应分子释放肿瘤坏死因子 TNF-α 可以直接杀伤肿瘤细胞，也可以促进 T 细胞分泌各种炎，具有复杂的生物学效能；IL-2 被称为 T 细胞生长因子，是趋化因子家族中主要由活化的 T 细胞产生，在机体的免疫和抗病毒感染中起到了重要的作用；抗病毒，抗肿瘤和免疫调节的作用，也参与到人体的各种免疫调节和炎症反应体受到感染时，CTL 细胞会释放出 perforin 和 granzyme 等具有细胞溶解作用子，在 perforin 作用下，granzyme 会进入靶细胞的胞质中造成其凋亡。这几子在 CTL 细胞清除细菌病毒和肿瘤细胞中都起到了重要作用。为了探究 CNPs 对这些细胞分子的分泌和效应分子的释放是否有影响，在 胞共培养 4 天后，我们对其分泌的细胞因子和效应分子进行了检测。结果显
2-7 CNPs 降低了 CTL 细胞内 ROS 水平并激活了 NF- 通路。（A）胞内 ROS 水平果；（B）（C）MMP 检测和定量统计；（D）NF- 信号通路相关蛋白表达。图中±标准差，显著性差异表示为***（P <0.001），**（P<0.01），ns（p>0.05），每组2.2.6 阻断 NF- 信号通路后 ROS 水平不会发生改变为了进一步探究 CNPs 对 NF- 信号通路的影响，我们用 IMD-0354（IKK阻断了 NF-κB 信号通路中 IκBα 蛋白的磷酸化，然后检测 CNPs 对 CTL 细胞用是否发生变化。经 IMD-0354 处理后，IKKβ，p-IκBα 的表达量明显下降，而达量上升，说明细胞内的 NF- 信号通路被明显抑制，即 IMD-0354 能有信号通路的激活（图 2-8 A）。紧接着我们检测了细胞内的 ROS 水平和，结果显示用 CNPs 处理细胞后加入 IMD-0354 并不能使其恢复到未处理前说明 NF- 信号通路对 ROS 水平没有影响（图 2-8 B，C）。
本文编号：3022936
【文章来源】：中国人民解放军陆军军医大学重庆市
【文章页数】：76 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
CNPs的合成与表征
图 2-3 CNPs 对 CD8+T 细胞的增殖没有影响。（A）（B）Ki67 染色 CD8+T 细胞的点统计结果图；（C）CFSE 染色 CD8+T 细胞荧光分布图，数字代表细胞分裂代数。图中均数±标准差，显著性差异表示为 ns（p>0.05），每组 n=3。2.2.3 CNPs 促进了细胞因子分泌和细胞效应分子释放肿瘤坏死因子 TNF-α 可以直接杀伤肿瘤细胞，也可以促进 T 细胞分泌各种炎，具有复杂的生物学效能；IL-2 被称为 T 细胞生长因子，是趋化因子家族中主要由活化的 T 细胞产生，在机体的免疫和抗病毒感染中起到了重要的作用；抗病毒，抗肿瘤和免疫调节的作用，也参与到人体的各种免疫调节和炎症反应体受到感染时，CTL 细胞会释放出 perforin 和 granzyme 等具有细胞溶解作用子，在 perforin 作用下，granzyme 会进入靶细胞的胞质中造成其凋亡。这几子在 CTL 细胞清除细菌病毒和肿瘤细胞中都起到了重要作用。为了探究 CNPs 对这些细胞分子的分泌和效应分子的释放是否有影响，在 胞共培养 4 天后，我们对其分泌的细胞因子和效应分子进行了检测。结果显
2-7 CNPs 降低了 CTL 细胞内 ROS 水平并激活了 NF- 通路。（A）胞内 ROS 水平果；（B）（C）MMP 检测和定量统计；（D）NF- 信号通路相关蛋白表达。图中±标准差，显著性差异表示为***（P <0.001），**（P<0.01），ns（p>0.05），每组2.2.6 阻断 NF- 信号通路后 ROS 水平不会发生改变为了进一步探究 CNPs 对 NF- 信号通路的影响，我们用 IMD-0354（IKK阻断了 NF-κB 信号通路中 IκBα 蛋白的磷酸化，然后检测 CNPs 对 CTL 细胞用是否发生变化。经 IMD-0354 处理后，IKKβ，p-IκBα 的表达量明显下降，而达量上升，说明细胞内的 NF- 信号通路被明显抑制，即 IMD-0354 能有信号通路的激活（图 2-8 A）。紧接着我们检测了细胞内的 ROS 水平和，结果显示用 CNPs 处理细胞后加入 IMD-0354 并不能使其恢复到未处理前说明 NF- 信号通路对 ROS 水平没有影响（图 2-8 B，C）。
本文编号：3022936
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