锶/钙交联海藻酸盐水凝胶对小鼠前体成骨细胞成骨分化的影响

发布时间：2021-02-18 03:43

　　研究目的:将氯化锶和氯化钙以不同比例混合制备含锶海藻酸盐水凝胶,检测海藻酸盐水凝胶的部分理化性质,研究接种在水凝胶支架上的小鼠MC3T3-E1细胞成骨分化情况。研究方法:根据交联剂中钙离子和锶离子的比例不同,制备5组（分别为Sr0、Sr1、Sr2、Sr3、Sr4组,Sr0为对照组）交联剂终浓度为4g/L的电解液,并分别与pH值为7.4的2%wt海藻酸钠溶液等比混合交联,制备直径为15mm,厚度为1mm的圆形水凝胶。通过电感耦合等离子体光谱仪（ICP）检测各组水凝胶浸泡在磷酸盐缓冲溶液（PBS）中第1、3、5、10、14天的锶离子析出浓度;将水凝胶浸泡在含有溶菌酶的PBS中计算各组水凝胶的降解速率;将小鼠MC3T3-E1细胞接种于水凝胶表面培养,并更换成骨培养基,在第3、7、14天时检测各组细胞的碱性磷酸酶（ALP）表达情况;各组水凝胶接种MC3T3-E1细胞,在成骨培养第21天时采用茜素红染色,观察钙结节形成情况;各组水凝胶接种MC3T3-E1细胞,在成骨培养第3、7、14、21天时,采用实时荧光定量PCR技术（RT-qPCR）检测各组成骨特异性基因的表达;各组水凝胶接种MC3T3-E... 

【文章来源】：青岛大学山东省

【文章页数】：43 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
abstract
引言
第1章 材料与方法
    1.1 实验材料、试剂和设备
        1.1.1 细胞来源
        1.1.2 主要材料、试剂
        1.1.3 主要仪器、设备
    1.2 实验方法
        1.2.1 海藻酸盐水凝胶的配置
2和Cacl₂溶液的配制">            1.2.1.1 Srcl₂和Cacl₂溶液的配制
            1.2.1.2 海藻酸钠溶液的配置
            1.2.1.3 含锶海藻酸盐水凝胶的制备
        1.2.2 含锶交联海藻酸盐水凝胶中锶离子析出浓度检测
        1.2.3 含锶交联海藻酸盐水凝胶降解率检测
        1.2.4 MC3T3-E1细胞的成骨培养
            1.2.4.1 MC3T3-E1细胞的培养
            1.2.4.2 成骨诱导培养基的配置
        1.2.5 含锶交联海藻酸盐水凝胶表面接种细胞
        1.2.6 含锶交联海藻酸盐水凝胶表面细胞的碱性磷酸酶活性检测
        1.2.7 含锶交联海藻酸盐水凝胶表面的钙结节检测
        1.2.8 含锶交联海藻酸盐水凝胶表面细胞的成骨相关基因检测
        1.2.9 含锶交联海藻酸盐水凝胶表面细胞的成骨相关蛋白检测
    1.3 统计学处理
第2章 结果
    2.1 含锶交联海藻酸盐水凝胶表面观
2+析出浓度的测定">    2.2 含锶交联海藻酸盐水凝胶浸出液中Sr²⁺析出浓度的测定
    2.3 含锶交联海藻酸盐水凝胶降解率的测定
    2.4 含锶交联海藻酸盐水凝胶表面细胞的碱性磷酸酶活性的测定
    2.5 含锶交联海藻酸盐水凝胶表面钙结节的观察
    2.6 含锶交联海藻酸盐水凝胶表面细胞的成骨相关基因的测定
    2.7 含锶交联海藻酸盐水凝胶表面细胞的成骨相关蛋白的测定
第3章 讨论
第4章 结论
参考文献
综述
    综述参考文献
攻读学位期间的研究成果
附录
    缩略词表
致谢



本文编号：3038985