蛋白质磷酸化与糖基化位点同时识别纳米荧光探针的构建与应用

发布时间：2021-03-05 05:54

　　蛋白质的翻译后修饰几乎涉及所有的生命过程,在蛋白质的功能和活性中起着非常重要的调节作用。其中,蛋白质糖基化和磷酸化是最常见的翻译后修饰。糖基化位点作为生物标志物和治疗靶标,参与许多疾病的发生和发展。研究表明,磷蛋白的含量异常与许多疾病的发病机理密切相关。但是,在生物学中蛋白质的糖基化和磷酸化之间是否存在一定的相关性,仍没有明确的定论。因此,研究蛋白质糖基化与磷酸化之间的关系被认为是了解主要疾病发生和发展的有效途径,对研究疾病的发病机制和早期诊断具有重要意义。基于此,本文以Zr（IV）和硼酸为活性中心分别发展了两种类型的MOFs纳米探针。通过Zr（IV）与磷酸盐的特异性相互作用实现了磷酸化位点的荧光检测。利用硼酸与顺式二醇的特异性作用,结合茜素红调控探针的荧光,实现了糖基化位点的特异性识别。最后,将制备的纳米探针应用于抑郁小鼠体内糖基化和磷酸化水平的原位荧光成像。具体工作部分如下:1.以Zr（IV）和硼酸为活性中心,设计合成了同时识别糖基化与磷酸化位点的MOFs纳米探针。利用Zr（IV）与磷酸盐之间的特异性相互作用,实现了磷酸化位点的荧光成像。为了实现对糖基化位点的特异性识别,在MOFs... 

【文章来源】：山东师范大学山东省

【文章页数】：66 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

蛋白质纳米孔技术测定蛋白磷酸化[17]

山东师范大学硕士学位论文3图1-2Trm-SH2用于分析酪氨酸磷酸化状态示意图[18]2018年，MingliangYe等人[19]提出了一种伪靶向MS方法（图1-3），以鉴定微量样品中的低丰度磷酸化。因为两个阶段使用了相同的样品和相同的液相色谱系统，不需要样品分级分离或富集，这使得该方法可以分析微量样品。作者已经证明，此方法具有较高的灵敏度可以识别内源性Shc1蛋白复合物上的磷酸化位点。平行反应监测（PRM）通常用于靶向蛋白质组学中的目标肽，而这种伪靶向MS方法使PRM能够识别新肽。在这种新方法中，将从数据依赖性采集（DDA）的数据集中识别出的低可信度肽用于构建PRM分析的伪靶向库，从而可以识别新的高可信度肽。因此，该策略不仅用于于分析蛋白质磷酸化，也适用于分析痕量样品中的其他低丰度多肽。图1-3伪靶向策略测定蛋白质磷酸化位点[19]

山东师范大学硕士学位论文3图1-2Trm-SH2用于分析酪氨酸磷酸化状态示意图[18]2018年，MingliangYe等人[19]提出了一种伪靶向MS方法（图1-3），以鉴定微量样品中的低丰度磷酸化。因为两个阶段使用了相同的样品和相同的液相色谱系统，不需要样品分级分离或富集，这使得该方法可以分析微量样品。作者已经证明，此方法具有较高的灵敏度可以识别内源性Shc1蛋白复合物上的磷酸化位点。平行反应监测（PRM）通常用于靶向蛋白质组学中的目标肽，而这种伪靶向MS方法使PRM能够识别新肽。在这种新方法中，将从数据依赖性采集（DDA）的数据集中识别出的低可信度肽用于构建PRM分析的伪靶向库，从而可以识别新的高可信度肽。因此，该策略不仅用于于分析蛋白质磷酸化，也适用于分析痕量样品中的其他低丰度多肽。图1-3伪靶向策略测定蛋白质磷酸化位点[19]


本文编号：3064692