丝素蛋白/壳聚糖三维多孔支架材料的构建表征与细胞学体外实验研究
发布时间：2021-05-11 15:43
骨组织工程是应用生命科学和工程学的基本原理和技术,再生新的骨组织,用以修复骨组织病变或缺损。其基本思路是将特异性成骨细胞种植于具有一定生物特性的并在人体内可逐渐降解吸收的支架材料上,经体外培养形成细胞生物材料复合物,然后将复合物植入人体的骨组织缺损部位,在细胞不断增殖并分泌基质的同时,支架材料逐步降解被人体吸收,最终形成新的具有与原功能和形态相似的骨组织。骨组织工程是近年来最受关注的领域之一,它在解决由于创伤、感染、肿瘤等原因所造成的骨缺损这一问题上具有很大的优势。在骨组织工程三要素：种子细胞、生长因子、支架材料中,支架材料是骨组织工程的关键,它不仅将种子细胞和生长因子运送至缺损区,还给新生骨组织提供支撑作用。目前,支架材料是骨组织工程中的研究热点,尤其是复合支架材料。丝素蛋白和壳聚糖都是天然高分子材料,具有良好的生物特性及独特的机械特性,成为近年来较热门的组织工程学材料。本试验将一定浓度的丝素蛋白溶液和壳聚糖溶液以不同质量比例相混合,通过数次冷冻干燥合并化学交联的方法制备出具有一定强度的多孔性支架,对其微观结构及相关的性能进行初步研究,筛选出适合成骨细胞生长的理想支架材料,为今后的骨...
【文章来源】：南方医科大学广东省
【文章页数】：80 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
第一章 前言
1.1 骨组织工程概述
1.2 骨组织工程支架材料
1.2.1 支架材料所需满足的条件
1.2.2 复合支架材料的分类
1.3 丝素蛋白和壳聚糖
1.3.1 丝素蛋白
1.3.2 壳聚糖
1.4 丝素蛋白,壳聚糖在骨组织工程学中的研究进展
1.5 本论文的研究内容
第二章 丝素蛋白/壳聚糖三维多孔支架材料的构建及结构表征的研究
2.1 引言
2.2 材料与方法
2.2.1 实验材料、试剂和仪器
2.2.2 SF/CS支架材料的制备
2.2.3 材料结构及形貌观察
2.2.4 电镜观察
2.2.5 孔隙率测试
2.2.6 红外分析
2.2.7 X射线衍射分析
2.2.8 电子能谱分析
2.2.9 统计分析
2.3 结果
2.3.1 宏观形态
2.3.2 电镜观察
2.3.3 孔隙率测试
2.3.4 红外分析
2.3.5 X射线衍射分析
2.3.6 电子能谱分析
2.4 讨论
2.4.1 支架材料的制备方法
2.4.2 优良的孔隙率
2.4.3 支架结构表征分析
2.5 本章小结
第三章 丝素蛋白/壳聚糖三维多孔支架材料理化性能及降解试验的研究
3.1 引言
3.2 材料与方法
3.2.1 材料、试剂和仪器
3.2.2 样品制备及试剂配制
3.2.3 吸水率
3.2.4 溶胀率
3.2.5 降解性能试验
3.2.6 统计学分析
3.3 结果
3.3.1 支架材料理化性能的检测
3.3.2 降解性能试验
3.4 讨论
3.5 本章小结
第四章 丝素蛋白/壳聚糖三维多孔支架材料生物相容性及成骨性能的研究
4.1 引言
4.2 材料与方法
4.2.1 材料、试剂和仪器
4.2.2 样品制备及实验分组
4.2.3 成骨细胞MG-63的培养
4.2.4 MG-63在实验组支架材料上的生长状况及形态学观察
4.2.5 MG-63与支架材料的生物相容性检测
4.2.6 MG-63与支架材料的细胞活性检测
4.2.7 统计学分析
4.3 结果
4.3.1 MG-63细胞在培养瓶的生长情况
4.3.2 MG-63细胞在支架上的生长情况
4.3.3 细胞黏附率情况
4.3.4 Hoechst染色结果
4.3.5 细胞增殖情况
4.3.6 碱性磷酸酶活性测定
4.3.7 形成钙化结节能力的观察结果
4.4 讨论
4.5 本章小结
第五章 结论
参考文献
中英文缩略词表
成果
致谢
统计合格证明
【参考文献】：
期刊论文
[1]骨组织工程的发展趋势[J]. 崔福斋. 中国医疗器械信息. 2010(02)
[2]多孔型丝素蛋白/羟基磷灰石复合脂肪间充质干细胞修复兔股骨骨缺损[J]. 施咏毅,王根林,杨惠林,卢神州,张亚,蔡鑫. 中国组织工程研究与临床康复. 2010(08)
[3]壳聚糖/β-磷酸三钙/重组人骨形态发生蛋白2可注射性复合体修复兔下颌骨缺损[J]. 赵清桐,赖仁发,汪距,李红. 中国组织工程研究与临床康复. 2009(51)
[4]壳聚糖支架材料在骨组织工程中的应用[J]. 五味子,唐昭. 中国口腔种植学杂志. 2008(02)
[5]纳米羟基磷灰石/壳聚糖-羧甲基纤维素复合支架材料的研究[J]. 蒋柳云,李玉宝,张利,王学江. 无机材料学报. 2008(01)
[6]桑蚕丝素-RGD融合蛋白的固态结构及其细胞粘附性分析[J]. 姚菊明,祝永强,李媛,励丽. 化学学报. 2006(12)
[7]微纳米羟基磷灰石及其复合材料研究进展[J]. 李俊杰,姚晖,陈亦平,柏金根,马军阳,姚康德. 化工进展. 2006(06)
[8]三种培养条件下兔骨髓间充质干细胞的成骨特性[J]. 陈光兴,杨柳,唐康来,段小军,周红星,李忠,郭林,林炎水. 中华创伤杂志. 2006(02)
[9]纳米羟基磷灰石/壳聚糖复合骨修复材料的共沉淀法制备及其性能表征[J]. 张利,李玉宝,魏杰,左奕,韩纪梅,吴兰,王学江. 功能材料. 2005(03)
[10]人骨髓间充质干细胞的分离培养及向成骨细胞定向分化的实验研究[J]. 康非吾,吴正华,黄欣,唐休发,温玉明. 口腔颌面外科杂志. 2004(04)
本文编号：3181670
【文章来源】：南方医科大学广东省
【文章页数】：80 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
第一章 前言
1.1 骨组织工程概述
1.2 骨组织工程支架材料
1.2.1 支架材料所需满足的条件
1.2.2 复合支架材料的分类
1.3 丝素蛋白和壳聚糖
1.3.1 丝素蛋白
1.3.2 壳聚糖
1.4 丝素蛋白,壳聚糖在骨组织工程学中的研究进展
1.5 本论文的研究内容
第二章 丝素蛋白/壳聚糖三维多孔支架材料的构建及结构表征的研究
2.1 引言
2.2 材料与方法
2.2.1 实验材料、试剂和仪器
2.2.2 SF/CS支架材料的制备
2.2.3 材料结构及形貌观察
2.2.4 电镜观察
2.2.5 孔隙率测试
2.2.6 红外分析
2.2.7 X射线衍射分析
2.2.8 电子能谱分析
2.2.9 统计分析
2.3 结果
2.3.1 宏观形态
2.3.2 电镜观察
2.3.3 孔隙率测试
2.3.4 红外分析
2.3.5 X射线衍射分析
2.3.6 电子能谱分析
2.4 讨论
2.4.1 支架材料的制备方法
2.4.2 优良的孔隙率
2.4.3 支架结构表征分析
2.5 本章小结
第三章 丝素蛋白/壳聚糖三维多孔支架材料理化性能及降解试验的研究
3.1 引言
3.2 材料与方法
3.2.1 材料、试剂和仪器
3.2.2 样品制备及试剂配制
3.2.3 吸水率
3.2.4 溶胀率
3.2.5 降解性能试验
3.2.6 统计学分析
3.3 结果
3.3.1 支架材料理化性能的检测
3.3.2 降解性能试验
3.4 讨论
3.5 本章小结
第四章 丝素蛋白/壳聚糖三维多孔支架材料生物相容性及成骨性能的研究
4.1 引言
4.2 材料与方法
4.2.1 材料、试剂和仪器
4.2.2 样品制备及实验分组
4.2.3 成骨细胞MG-63的培养
4.2.4 MG-63在实验组支架材料上的生长状况及形态学观察
4.2.5 MG-63与支架材料的生物相容性检测
4.2.6 MG-63与支架材料的细胞活性检测
4.2.7 统计学分析
4.3 结果
4.3.1 MG-63细胞在培养瓶的生长情况
4.3.2 MG-63细胞在支架上的生长情况
4.3.3 细胞黏附率情况
4.3.4 Hoechst染色结果
4.3.5 细胞增殖情况
4.3.6 碱性磷酸酶活性测定
4.3.7 形成钙化结节能力的观察结果
4.4 讨论
4.5 本章小结
第五章 结论
参考文献
中英文缩略词表
成果
致谢
统计合格证明
【参考文献】：
期刊论文
[1]骨组织工程的发展趋势[J]. 崔福斋. 中国医疗器械信息. 2010(02)
[2]多孔型丝素蛋白/羟基磷灰石复合脂肪间充质干细胞修复兔股骨骨缺损[J]. 施咏毅,王根林,杨惠林,卢神州,张亚,蔡鑫. 中国组织工程研究与临床康复. 2010(08)
[3]壳聚糖/β-磷酸三钙/重组人骨形态发生蛋白2可注射性复合体修复兔下颌骨缺损[J]. 赵清桐,赖仁发,汪距,李红. 中国组织工程研究与临床康复. 2009(51)
[4]壳聚糖支架材料在骨组织工程中的应用[J]. 五味子,唐昭. 中国口腔种植学杂志. 2008(02)
[5]纳米羟基磷灰石/壳聚糖-羧甲基纤维素复合支架材料的研究[J]. 蒋柳云,李玉宝,张利,王学江. 无机材料学报. 2008(01)
[6]桑蚕丝素-RGD融合蛋白的固态结构及其细胞粘附性分析[J]. 姚菊明,祝永强,李媛,励丽. 化学学报. 2006(12)
[7]微纳米羟基磷灰石及其复合材料研究进展[J]. 李俊杰,姚晖,陈亦平,柏金根,马军阳,姚康德. 化工进展. 2006(06)
[8]三种培养条件下兔骨髓间充质干细胞的成骨特性[J]. 陈光兴,杨柳,唐康来,段小军,周红星,李忠,郭林,林炎水. 中华创伤杂志. 2006(02)
[9]纳米羟基磷灰石/壳聚糖复合骨修复材料的共沉淀法制备及其性能表征[J]. 张利,李玉宝,魏杰,左奕,韩纪梅,吴兰,王学江. 功能材料. 2005(03)
[10]人骨髓间充质干细胞的分离培养及向成骨细胞定向分化的实验研究[J]. 康非吾,吴正华,黄欣,唐休发,温玉明. 口腔颌面外科杂志. 2004(04)
本文编号：3181670
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