钛支架人工角膜生物相容性的临床和实验研究
发布时间:2021-06-06 18:42
目的评价现有钛支架人工角膜的组织相容性,研究气浮沉积(aerosol deposition, AD)技术制备的纳米级羟基磷灰石涂层对钛支架材料组织结合力、角膜成纤维细胞生物学行为以及角膜组织植入反应的影响。方法1.回顾性病例研究。选择2000年1月至2009年12月间在解放军总医院进行人工角膜植入手术的患者85例(85只眼)。术后对支架前层组织和镜柱前后表面进行临床观察。对手术切除的人工角膜PMMA填芯前后组织以及柱镜表面增生膜进行病理分析。2.采用钛箔制备10×40mm的长方形植入材料样品36个,平均分3组,组1和组2分别应用气浮沉积(aerosol deposition, AD)技术和离子束辅助沉积(Ionbeam assisted deposition, IBAD)技术在纯钛表面制备羟基磷灰石涂层,组3为对照组。每组各取2个材料样品分别应用扫描电子显微镜和原子力显微镜进行HA涂层的表面分析。将其余24个材料随机植入12只家兔双侧背部肌肉组织。2月后,取出样品及周围组织进行拉伸试验,记录各样品拉伸试验的最大载荷,分别对所得的钛片和周围肌肉组织进行超微结构和组织学观察。3.将钛箔制备...
【文章来源】:中国人民解放军医学院北京市
【文章页数】:103 页
【学位级别】:博士
【文章目录】:
缩略词表
摘要
Abstract
前言
参考文献
第一部分 钛支架人工角膜生物相容性的临床分析
材料和方法
1. 临床资料
2. 组织学检查
3. 统计学分析
结果
1. 术后视力
2. MICOF生物相容性的临床观察
2.1 角膜溶解
2.2 人工角膜镜柱表面组织增生
2.3 人工角膜后膜
3. 人工角膜周围组织的病理分析
3.1 PMMA填芯前后板层角膜
3.2 增生膜的病理分析
讨论
1. 角膜溶解和支架暴露
2. 人工角膜前膜
3. 人工角膜后膜
4. 小结
参考文献
第二部分 纳米级HA涂层对人工角膜用钛支架材料组织结合力的影响
材料和方法
1. 实验材料
1.1 实验动物
1.2 主要仪器和加工方法
1.3 主要试剂
2 实验方法
2.1 制备植入材料
2.2 HA-Ti的表面分析
2.3 体内植入手术
2.4 拉伸试验
2.5 组织学检查
2.6 扫描电镜
3. 统计学分析
结果
1. 植入物的表面形貌和表面光洁度分析
2. 生物力学检测
2.1 绘制载荷-位移曲线
2.2 最大载荷Pmax
3. 植入材料周围肌肉组织病理分析
4. 植入材料表面超微结构观察
讨论
1. 羟基磷灰石沉积技术的发展和应用
2. 材料不同表面微结构对软组织黏附力的影响
3. 组织植入反应
4. 小结
参考文献
第三部分 纳米级HA涂层对角膜成纤维细胞生物学行为的影响
材料和方法
1. 材料
1.1 实验仪器
1.2 试剂
1.3 细胞系和样品
2. 实验方法
2.1 技术路线
2.2 RCFB细胞在材料表面的培养和细胞毒性试验
2.3 划痕试验
2.4 MTT法检测细胞增殖情况
2.5 RT-PCR方法分析不同涂层表面细胞整合素的基因表达
2.6 流式细胞仪检测整合素β4的表达
2.7 细胞骨架观察
3. 统计学分析
结果
1. 细胞的培养观察和细胞毒性试验
2. 细胞的黏附
3. 细胞的移行
4. 细胞的增殖(MTT)
5. 黏附因子的基因表达
6. 整合素β4的蛋白表达
7. 细胞骨架的表达
讨论
1. 生物安全性检测
2. 纳米HA涂层对细胞生物功能性的影响
2.1 对细胞黏附的影响
2.2 对细胞迁移的影响
2.3 对细胞增殖的影响
3. 纳米HA涂层影响细胞行为的机制
3.1 纳米HA涂层对整合素影响
3.2 对细胞骨架蛋白的影响
4. 小结
参考文献
第四部分 AD技术制备的HA-Ti支架材料植入家兔角膜的体内研究
材料和方法
1. 实验材料
1.1 实验动物
1.2 主要仪器、试验样品和加工方法
1.3 主要试剂和药品
2. 实验方法
2.1 植入手术
2.2 眼内观察和角膜厚度测量
2.3 组织学检查
3 统计学分析
结果
1. 植入物眼内观察
2. OCT测量植入物前板层角膜厚度
3. 组织学检查
3.1 HE染色
3.2 苦味酸天狼星红-苏木素染色
讨论
1. 人工角膜支架材料的研究现况
2. 动物模型的选择
3. 植入物的体内观察
4. 病理分析
5. 小结
参考文献
全文总结
文献综述
参考文献
攻读学位期间发表文章情况
致谢
彩图
【参考文献】:
期刊论文
[1]人工角膜表面组织增生的临床病理分析[J]. 董莹,黄一飞,刘茜,杜改萍. 中华眼科杂志. 2011 (05)
[2]流式细胞仪的工作原理及应用[J]. 李超,韩金路,王玉刚,孙英凯. 中国实用医药. 2009(20)
[3]原子力显微镜在组织工程学中的应用[J]. 梁志红,周长忍. 生物医学工程学杂志. 2009(01)
[4]加固植床减少人工角膜脱出[J]. 徐锦堂,陈建苏. 眼科新进展. 2009(01)
[5]钛金属表面纳米化技术及纳米化后生物学特性变化的研究进展[J]. 陶凤娟,余优成,陈万涛. 中国口腔颌面外科杂志. 2008(06)
[6]经羟基磷灰石处理的纯钛表面有利于角膜成纤维细胞的粘附和增殖(英文)[J]. 马骁,李朝辉,黄一飞,陆玉杰,王乐云,黄靖香. 国际眼科杂志. 2007(01)
[7]流式细胞仪的发展历史及其原理和应用进展[J]. 魏熙胤,牛瑞芳. 现代仪器. 2006(04)
[8]纳米材料对生物体及环境的影响[J]. 冯晶,肖冰,陈敬超. 材料科学与工程学报. 2006(03)
[9]人工角膜植入术前视觉电生理检查的意义[J]. 董莹,黄一飞,王丽强,姜荔,陈兵. 中国伤残医学. 2006(03)
[10]人工角膜植入术[J]. 黄一飞. 眼科. 2005(03)
博士论文
[1]离子束辅助沉积羟基磷灰石修饰的钛人工角膜实验研究[D]. 尹东芳.中国人民解放军军医进修学院 2009
本文编号:3214934
【文章来源】:中国人民解放军医学院北京市
【文章页数】:103 页
【学位级别】:博士
【文章目录】:
缩略词表
摘要
Abstract
前言
参考文献
第一部分 钛支架人工角膜生物相容性的临床分析
材料和方法
1. 临床资料
2. 组织学检查
3. 统计学分析
结果
1. 术后视力
2. MICOF生物相容性的临床观察
2.1 角膜溶解
2.2 人工角膜镜柱表面组织增生
2.3 人工角膜后膜
3. 人工角膜周围组织的病理分析
3.1 PMMA填芯前后板层角膜
3.2 增生膜的病理分析
讨论
1. 角膜溶解和支架暴露
2. 人工角膜前膜
3. 人工角膜后膜
4. 小结
参考文献
第二部分 纳米级HA涂层对人工角膜用钛支架材料组织结合力的影响
材料和方法
1. 实验材料
1.1 实验动物
1.2 主要仪器和加工方法
1.3 主要试剂
2 实验方法
2.1 制备植入材料
2.2 HA-Ti的表面分析
2.3 体内植入手术
2.4 拉伸试验
2.5 组织学检查
2.6 扫描电镜
3. 统计学分析
结果
1. 植入物的表面形貌和表面光洁度分析
2. 生物力学检测
2.1 绘制载荷-位移曲线
2.2 最大载荷Pmax
3. 植入材料周围肌肉组织病理分析
4. 植入材料表面超微结构观察
讨论
1. 羟基磷灰石沉积技术的发展和应用
2. 材料不同表面微结构对软组织黏附力的影响
3. 组织植入反应
4. 小结
参考文献
第三部分 纳米级HA涂层对角膜成纤维细胞生物学行为的影响
材料和方法
1. 材料
1.1 实验仪器
1.2 试剂
1.3 细胞系和样品
2. 实验方法
2.1 技术路线
2.2 RCFB细胞在材料表面的培养和细胞毒性试验
2.3 划痕试验
2.4 MTT法检测细胞增殖情况
2.5 RT-PCR方法分析不同涂层表面细胞整合素的基因表达
2.6 流式细胞仪检测整合素β4的表达
2.7 细胞骨架观察
3. 统计学分析
结果
1. 细胞的培养观察和细胞毒性试验
2. 细胞的黏附
3. 细胞的移行
4. 细胞的增殖(MTT)
5. 黏附因子的基因表达
6. 整合素β4的蛋白表达
7. 细胞骨架的表达
讨论
1. 生物安全性检测
2. 纳米HA涂层对细胞生物功能性的影响
2.1 对细胞黏附的影响
2.2 对细胞迁移的影响
2.3 对细胞增殖的影响
3. 纳米HA涂层影响细胞行为的机制
3.1 纳米HA涂层对整合素影响
3.2 对细胞骨架蛋白的影响
4. 小结
参考文献
第四部分 AD技术制备的HA-Ti支架材料植入家兔角膜的体内研究
材料和方法
1. 实验材料
1.1 实验动物
1.2 主要仪器、试验样品和加工方法
1.3 主要试剂和药品
2. 实验方法
2.1 植入手术
2.2 眼内观察和角膜厚度测量
2.3 组织学检查
3 统计学分析
结果
1. 植入物眼内观察
2. OCT测量植入物前板层角膜厚度
3. 组织学检查
3.1 HE染色
3.2 苦味酸天狼星红-苏木素染色
讨论
1. 人工角膜支架材料的研究现况
2. 动物模型的选择
3. 植入物的体内观察
4. 病理分析
5. 小结
参考文献
全文总结
文献综述
参考文献
攻读学位期间发表文章情况
致谢
彩图
【参考文献】:
期刊论文
[1]人工角膜表面组织增生的临床病理分析[J]. 董莹,黄一飞,刘茜,杜改萍. 中华眼科杂志. 2011 (05)
[2]流式细胞仪的工作原理及应用[J]. 李超,韩金路,王玉刚,孙英凯. 中国实用医药. 2009(20)
[3]原子力显微镜在组织工程学中的应用[J]. 梁志红,周长忍. 生物医学工程学杂志. 2009(01)
[4]加固植床减少人工角膜脱出[J]. 徐锦堂,陈建苏. 眼科新进展. 2009(01)
[5]钛金属表面纳米化技术及纳米化后生物学特性变化的研究进展[J]. 陶凤娟,余优成,陈万涛. 中国口腔颌面外科杂志. 2008(06)
[6]经羟基磷灰石处理的纯钛表面有利于角膜成纤维细胞的粘附和增殖(英文)[J]. 马骁,李朝辉,黄一飞,陆玉杰,王乐云,黄靖香. 国际眼科杂志. 2007(01)
[7]流式细胞仪的发展历史及其原理和应用进展[J]. 魏熙胤,牛瑞芳. 现代仪器. 2006(04)
[8]纳米材料对生物体及环境的影响[J]. 冯晶,肖冰,陈敬超. 材料科学与工程学报. 2006(03)
[9]人工角膜植入术前视觉电生理检查的意义[J]. 董莹,黄一飞,王丽强,姜荔,陈兵. 中国伤残医学. 2006(03)
[10]人工角膜植入术[J]. 黄一飞. 眼科. 2005(03)
博士论文
[1]离子束辅助沉积羟基磷灰石修饰的钛人工角膜实验研究[D]. 尹东芳.中国人民解放军军医进修学院 2009
本文编号:3214934
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