hBMP2修饰的β-TCP/胶原支架对MC3T3-E1细胞成骨能力的影响

发布时间：2021-07-11 15:30

　　目的:构建含hBMP2（human bone morphogenetic proteins 2）质粒DNA的β-TCP/胶原（β-tricalcium phosphate/collagen）支架材料,并研究其对MC3T3-E1细胞成骨能力的影响。方法:制备纳米级多孔β-TCP/胶原支架并负载含hBMP2目的 DNA基因及对照质粒形成基因修饰的支架材料。建立MC3T3-E1细胞株与复合支架的体外培养体系。将其分为支架组hBMP2组（Z）对照质粒组（Z0）,平皿hBMP2组（M）和对照质粒组（M0）。复合培养后取样通过扫描电镜观察支架表面形态,成骨诱导1、3、7、14 d检测不同浓度BMP2支架组和非支架组细胞碱性磷酸酶（ALP）的活性,并在成骨诱导的不同时间点采用实时荧光定量PCR的方法检测Runx2、OCN、ALP、OPN等成骨相关标志基因表达。检测结果进行统计学分析。结果:含hBMP2为目的基因的质粒DNA修饰纳米β-TCP/I型胶原溶液复合材料表面呈多孔样结构;支架组和平皿组中加入hBMP2质粒DNA都能提高ALP的活性以及成骨相关标志基因的表达;支架组对MC3T3-E1细胞成骨促... 

【文章来源】：实用口腔医学杂志. 2017,33(05)北大核心CSCD

【文章页数】：5 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 实验设计与材料分组
    1.2 实验方法
        1.2.1 合成带有h BMP2基因的质粒DNA
        1.2.2 负载h BMP2为目的基因质粒DNA修饰纳米β-TCP/胶原溶液复合材料
        1.2.3 MC3T3-E1细胞培养
        1.2.4 材料与细胞复合培养
    1.3 检测方法与指标
        1.3.1 形态学观察
        1.3.2 碱性磷酸酶活性 (ALP) 检测
        1.3.3 实时荧光定量PCR检测
    1.4 统计学分析
2 结果
    2.1 形态学观察结果
        2.1.1 支架电镜图
        2.1.2 h BMP2转染效率
    2.2 碱性磷酸酶ALP活性检测结果
    2.3 实时荧光定量PCR检测细胞成骨相关基因表达结果
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]骨形成蛋白-2基因修饰的β磷酸三钙/胶原复合材料修复颅骨缺损[J]. 李娟,郑闱颖,卢岩,俞兰,林军.  材料科学与工程学报. 2013(02)
[2]大鼠脂肪干细胞体外培养及成骨诱导分化研究[J]. 梁丽华,李龙,赵建辉,孙道才,刘乃彬,宋应亮,焦铁军.  实用口腔医学杂志. 2012(03)
[3]骨形成蛋白-2转染MG-63细胞增加其对壳聚糖膜的粘附[J]. 范丽,卢岩,林慧平,姚航平,林军.  材料科学与工程学报. 2011(06)
[4]基于脂肪干细胞I型胶原凝胶PLGA-β-TCP支架的新型仿生骨组织工程复合体的构建及生物学性能[J]. 郝伟,胡蕴玉,姜明,吕荣,王军,赵廷宝.  第四军医大学学报. 2008(07)



本文编号：3278362