丝素蛋白/壳聚糖三维多孔支架的构建及体外细胞学初步研究

发布时间：2021-09-05 15:24

　　【目的】探讨丝素蛋白/壳聚糖（SF/CS）三维多孔支架的构建及成骨细胞MG-63在不同比例支架上的行为学,筛选出最适合用于骨组织工程的支架比例,为骨组织工程的治疗提供新的天然生物材料。【方法】第一部分:1.通过脱胶、溶解、透析等流程从蚕茧提取丝素蛋白溶液（SF）,并计算其浓度。2.配制浓度3%的壳聚糖溶液（CS）,制备不同比例丝素蛋白/壳聚糖三维多孔支架（SF/CS）。3.通过扫描电镜（SEM）研究不同比例三维支架的表面形态。4.通过X-射线衍射（XRD）和红外光谱仪（FTIR）研究支架内部的构象。5.研究SF/CS三维多孔支架在PBS中的膨胀率、双蒸水中的降解率。6.利用75%酒精溶液研究SF/CS三维支架的孔隙率,利用茜素红在支架中的渗透能力研究支架的营养物质运输能力。第二部分:1.用浸泡过SF/CS三维支架的培养基培养MG-63细胞,通过MTT、Hoechst法研究MG-63细胞在支架浸提液中的增殖能力,以评价支架是否具有细胞毒性。2.将MG-63细胞种到辐照灭菌好的SF/CS三维多孔支架中,分别通过计算细胞在支架中的黏附率,通过MTT研究细胞在支架上的增殖情况来研究细胞和支架的... 

【文章来源】：苏州大学江苏省 211工程院校

【文章页数】：66 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

丝素蛋白溶液的提取流程图

2.SF/CS 三维支架的表观测定上述所提取的SF溶液浓度，常规流程操作提取的SF溶液浓度为3%左右照不同比例配制同等浓度不同体积的 CS 溶液，加入 EDC、NHS 作为交联剂用 24 孔、96 孔细胞培养板为模具，经过冷冻干燥制成四种不同比例 SF/CS 三孔支架（50SF，40SF，30SF，20SF）。制备好的 SF/CS 三维支架用镊子夹取，肉眼可见支架表面有孔隙，颜色为乳白色（图 2）。

12图3.不同比例SF/CS三维支架电镜图（a:纯SF，b:纯CS，c:50SF，d:20SF，e:30SF，f:40SF）Fig.3 SEM of different ratio SF/CS scaffolds（a:pure silk scaffold，b:pure chitosan scaffold，c:50SF scaffold，d:20SF scaffold,e:30SF scaffold,f:40SF scaffold）


本文编号：3385597