载microRNA-15b-5p壳聚糖纳米粒子的制备及其对大鼠BMSCs成骨分化影响的初步研究

发布时间：2022-10-18 16:52

　　目的:探讨microRNA （miR）-15b-5p对大鼠来源骨髓间充质干细胞（bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs）成骨分化的调控功能,并构建壳聚糖/miR-15b-5p纳米粒子,研究该纳米粒子对于大鼠BMSCs成骨分化的影响。方法:提取大鼠原代BMSCs并诱导其成骨分化,检测miR-15b-5p在成骨分化过程中的表达变化。再在大鼠BMSCs中过表达miR-15b-5p并诱导其成骨分化,检测其成骨分化能力。进一步采用离子交联法制备不同质量比的壳聚糖/miR-15b-5p纳米粒子并表征其性能,将纳米粒子体外转染BMSCs及体内应用后,检测其成骨分化能力。其中,对照组不经任何处理,使用成骨分化诱导的为诱导组,过表达miR-15b-5p并成骨诱导的为转染诱导组。结果:在大鼠BMSCs成骨分化过程中,miR-15b-5p表达上调;过表达miR-15b-5p并诱导成骨后,其成骨相关基因（RUNX2、OPN、OCN等）表达高于诱导组和对照组;当壳聚糖/miR-15b-5p质量比为20∶1时,纳米粒子包封率达到（98.55±0.10）%,其形态均一,平均... 

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【文章目录】：
1 材料和方法
    1.1 原代BMSCs的分离、培养
    1.2 成骨分化
    1.3 茜素红染色
    1.4 mi R-15b-5p及成骨相关基因检测
    1.5 mi R-15b-5p转染BMSCs
    1.6 壳聚糖/mi R-15b-5p纳米粒子的制备
    1.7 壳聚糖/mi R-15b-5p纳米粒子表征的测定
        1.7.1 包封率测定
        1.7.2 粒径及形貌测定
        1.7.3 细胞毒性测定
        1.7.4 体外转染
    1.8 纳米粒子在大鼠颅骨缺损修复中的运用
    1.9 统计学分析
2 结果
    2.1 mi R-15b-5p在成骨分化中的作用
    2.2 壳聚糖/mi R-15b-5p纳米粒子表征
    2.3 壳聚糖/mi R-15b-5p纳米粒子促成骨分化能力
3 讨论



本文编号：3692695