改变肌动蛋白聚合状态调控人成纤维细胞成骨分化的线粒体动力学

发布时间：2024-02-28 00:01

　　目的检测在人成纤维细胞成骨分化过程中肌动蛋白的改变及其介导的线粒体动力学改变。方法诱导人成纤维细胞成骨分化,检测肌动蛋白和线粒体动力学的改变。在人成纤维细胞中打断(细胞松弛素D,Cyto D)或者促进(Jasplakinolide,JAS)肌动蛋白的聚合,于处理的第1、4、7 d分别进行免疫荧光和Western blot等实验检测细胞性能及线粒体动力学相关指标。结果 Cyto D减弱成骨诱导液效果,JAS增强成骨诱导液效果。JAS增强线粒体动力学效果比Cyto D更加显著。结论肌动蛋白的聚合促进细胞成骨分化;肌动蛋白的聚合或解聚影响细胞成骨分化过程中线粒体与细胞骨架肌动蛋白的共定位比率。Cyto D和JAS引起的对细胞成骨分化的影响和线粒体动力学的改变,可为研究细胞线粒体以及成骨分化机制提供生物学信息。

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【部分图文】：

图1免疫印迹法检测成骨诱导液培养HSF第1、4、7、14、21d的相关蛋白表达

加入JAS促进肌动蛋白聚合后第1～7d，线粒体融合蛋白Mfn2逐渐增加；线粒体分裂蛋白Drp1显著增加，且第4、7d的增加倍数远远高于线粒体融合蛋白Mfn2，说明促进肌动蛋白聚合后，线粒体动力学以线粒体分裂状态为主；而β-actin蛋白随着天数的增加，蛋白含量也随之显著增加，....

图3JAS对HSF线粒体和细胞骨架的影响

图2CytoD对HSF线粒体和细胞骨架的影响图4CytoD和JAS对成骨诱导液下HSF线粒体和细胞骨架的影响

图4CytoD和JAS对成骨诱导液下HSF线粒体和细胞骨架的影响

图3JAS对HSF线粒体和细胞骨架的影响细胞松弛素D是微管和微丝的干扰剂，可解聚肌动蛋白，使肌动蛋白失去作用，常用于探讨细胞骨架的作用[10]。邵开峰等[11]应用CytoD抑制肝癌细胞，发现肝癌细胞的粘附性发生了改变，认为肝癌细胞不具有正常细胞黏附行为，而是细胞骨架与肝癌细....

图2CytoD对HSF线粒体和细胞骨架的影响

线粒体分裂蛋白Drp1被认为是线粒体分裂特定的信号蛋白，其在肌动蛋白的组装下聚集，Drp1相互结合形成一个围绕线粒体的环状“低聚物”。然后环收缩，将线粒体分成两部分。通常认为Drp1分子在分裂前立即进入线粒体，形成寡聚物环。这种在线粒体上组装和齐聚Drp1的过程称为成熟。随着Dr....

本文编号：3913167