模拟体液法制备壳聚糖/羟磷灰石组织工程支架与评估

发布时间：2024-02-28 02:26

　　目的应用模拟体液(simulated body fluid, SBF)仿生矿化法制备羟磷灰石(hydroxyapatite,HA)-壳聚糖(chitosan,CHI)支架,并对支架的理化性能及自身的吸水性能、溶胀性能、降解性能进行评估,探讨矿化时间对支架结构的影响,并将成骨诱导后的脂肪基质干细胞接种到该支架上,通过观察细胞的增殖分化情况验证该支架的细胞相容性,进一步了解该支架对细胞生长的影响。方法先将壳聚糖粉末溶于2%乙酸溶液中,应用冷冻干燥法制备壳聚糖支架,NaOH乙醇-水溶液除酸,多聚磷酸钠交联;将该支架应用交替浸泡法进行预钙化,然后浸入模拟体液中进行矿化,控制矿化时间分别为7d、14d、21d,即为三组实验组,单纯壳聚糖支架为对照组,检测支架的大体形态、内部结构、孔径、孔隙率、物质组成、官能团组成、机械力学性能及吸水率、溶胀率、降解性能、热力学性质等属性,再将经过成骨诱导后的脂肪基质干细胞(adipose-derived stem cells, ADSCs)接种到支架上,观察细胞-支架复合物粘附性、进行Live/Dead染色、免疫组织化学染色、茜素红染色分析、定量分析细胞增殖量、...

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【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图1壳聚糖支架的大体形态（左）及在光学显微镜下的观察（右）×100

其中F为截面载荷，S为截面面积，dH为支架高度的变化，H为支初始高度。（7）统计学分析采用国际通用的SPSS22.0软件，先检查方差齐性，若方差齐则采用单因素方分析，并采用LSD组间两两多重比较，若方差不齐将采用校正后的方差分析，用Dunnett’s方法进....

图2实验组及对照组的支架特征×600（1）实验组及对照组支架的扫面电子显微镜结果如图2所示

将首次冻干后的壳聚糖支架放入水中后，会很快发现其溶于水中，但是将材料放入氢氧化钠乙醇水溶液3小时后再次冻干，支架材料仍然会有一部分溶失的现象，但是较初次冻干者支架的溶失率低，说明氢氧化钠乙醇水溶液中和了壳聚糖溶液中的乙酸。再经多聚磷酸钠化学交联剂交联24小时，用超纯水彻底....

图3实验组及对照组孔径测试图像×200a：7d组；b：14d组；c：21d组；d:PureCHI组图3为每个实验组及对照组具有代表性的图片，从该类平行图片中测得支架材料的孔径

（2）将单纯壳聚糖支架材料经过预钙化以后，浸泡入模拟体液之后根据时间不同（7天、14天、21天）得到以上A、B、C三张图片，当在模拟体液中矿化7天时（图中A图片），会观察到在支架的孔壁上会形成少量的矿化物，对支架的孔径、孔隙率没有明显的影响；当在模拟体液中矿化....

图4实验组及对照组支架材料的孔隙率

图4实验组及对照组支架材料的孔隙率由实验结果可知，虽然各个组别的支架材料在模拟体液中矿化时间不同，但是所有组中孔隙率均高于90%，符合骨组织工程支架材料对孔隙率的要求[30]。同时，矿化时间对支架的孔隙率有着重要的影响，其趋势是矿化时间与支架的孔隙率成反比，但不是特别明显，....

本文编号：3913326