组织工程骨膜的构建及其同种异体体内成骨修复兔肩胛骨缺损的实验研究

发布时间：2017-09-03 14:27

  本文关键词：组织工程骨膜的构建及其同种异体体内成骨修复兔肩胛骨缺损的实验研究

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【摘要】：目的：兔骨髓间充质干细胞(BMSCs)作为组织工程种子细胞复合自制猪小肠粘膜下层(SIS)联合培养,体外构建组织工程化骨膜(TEP),观察其生物学特性并检测成骨活性,进一步植入异体兔体内对肩胛骨缺损进行修复,探讨人工骨膜修复大块不规则骨缺损的可行性。 方法：以猪小肠粘膜下层(SIS)基质作为支架材料,与体外成骨诱导培养后的第三代兔骨髓间充质干细胞(BMSCs),采用沉淀法复合构建组织工程化骨膜,MTT法和扫描电镜检测种子细胞在支架材料的生长、黏附情况,体外检测碱性磷酸酶与骨钙素表达,并取6月龄新西兰大白兔24只制备单侧肩胛骨3cm×3cm次全切骨缺损模型,随机分为实验组和对照组(n=12),分别于缺损处植入组织工程骨膜和单纯SIS。术后观察动物大体情况；4、8、12周时处死动物后行X线片观察并按Lane-Sandhu X线片评分标准评分；行标本大体观察后,行HE及Masson染色观察。 结果：种子细胞在SIS上生长良好,组织工程骨膜在含有成骨诱导剂的培养基中培养可分泌一定量骨钙素(11d达峰值),并表达碱性磷酸酶活性(7d达峰值),植入体内后各时间段,X线片观察示实验组骨缺损区有片状新生骨形成,密度与正常骨相同,随着时间的增加,新生骨数量也不断增多；对照组骨缺损区无骨形成征象,骨缺损区密度与周围软组织影相近。至12周标本大体观察示实验组两端桥接部已形成骨性愈合,部分骨缺损区已被新生骨填充；对照组无骨组织生成。HE及Masson染色示实验组骨缺损处有新骨生成,骨组织中可见血管腔及髓腔样结构,未见明显巨噬细胞及淋巴细胞浸润；对照组骨缺损区仅为胶原瘢痕组织和纤维样结构,无骨组织生成。 结论：组织工程化骨膜能够在体外保持较稳定的生物活性,分泌一定量的碱性磷酸酶和骨钙素,植入实验动物体内后在同种异体体内可以成骨,具有修复大块不规则骨缺损的可行性。
【关键词】：骨髓间充质干细胞 猪小肠黏膜下层 组织工程骨膜 肩胛骨缺损 兔
【学位授予单位】：兰州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R318.08;R681
【目录】：

• 中文摘要4-5
• Abstract5-7
• 目录7-8
• 前言8-11
• 第一章 组织工程化骨膜的构建11-20
• 1. 材料和方法11-14
• 2. 结果14-18
• 3. 讨论18-19
• 4. 结论19-20
• 第二章 组织工程化骨膜体外成骨活性检测20-28
• 1. 材料和方法20-23
• 2. 结果23-26
• 3. 讨论26-27
• 4. 结论27-28
• 第三章 组织工程骨膜修复肩胛骨骨缺损的实验研究28-39
• 1. 材料与方法28-31
• 2. 结果31-36
• 3. 讨论36-38
• 4. 结论38-39
• 参考文献39-43
• 在学期间的研究成果43-44
• 致谢44

【参考文献】

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本文编号：785550