重组人骨形态发生蛋白-2的制备及成骨活性表征

发布时间：2017-09-05 10:27

  本文关键词：重组人骨形态发生蛋白-2的制备及成骨活性表征

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【摘要】：骨形态发生蛋白-2(BMP-2)是重要的骨诱导生长因子,是提高骨修复材料活性和临床骨修复效果的有效手段和关键物质。由于BMP-2在体内含量低,依靠从动物体内提取难以满足临床需求。本文研究满足临床需求的BMP-2的制备方法,并评价其生物活性。采用密码子优化方法,并通过进一步更换其中部分核苷酸编码,得到优化的h BMP-2基因的DNA序列,制备大肠杆菌rh BMP-2菌株,通过发酵及工艺优化,获得BMP包涵体,经分离纯化与复性,制备出高纯度的rh BMP-2。测定C2C12细胞的碱性磷酸酶(ALP)活性来表征单倍体和二倍体BMP-2的成骨活性,发现二倍体rh BMP-2的成骨活性明显高于单倍体rh BMP-2,并且随着BMP-2浓度增加,碱性磷酸酶活性上升。体内动物异位成骨实验发现rh BMP-2肌带植入小鼠体内3周后,取出的异位骨颗粒鲜艳饱满,骨结构完整;HE切片和Masson三色切片都显示出良好的异位成骨效果。此方法制备的rh BMP-2具有良好的诱导成骨分化能力,可用于骨组织修复,满足临床需要。
【作者单位】： 华东理工大学教育部医用生物材料工程研究中心;
【关键词】： 骨修复 生物医学工程 蛋白质 蛋白质复性 骨形态发生蛋白- 原核表达
【基金】：国家重点基础研究发展计划项目(2012CB933600)~~
【分类号】：R318.08
【正文快照】： 联系人:刘昌胜。第一作者:李贵龙(1988—),男,硕士研究生。Received date:2015-06-04.Corresponding author:Prof.LIU Changsheng,liucs@ecust.edu.cnFoundation item:supported by the National Basic Research Programof China(2012CB933600).引言近年来,因疾病、创伤、人口

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本文编号：797435