载EPO壳聚糖—明胶水凝胶应用于兔上颌窦提升术的研究

发布时间：2017-09-20 20:28

  本文关键词：载EPO壳聚糖—明胶水凝胶应用于兔上颌窦提升术的研究

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【摘要】：因炎症、肿瘤、外科手术、先天因素和增龄等各种原因造成的上颌后区骨量不足是口腔医学领域中常见的临床现象，常规治疗方法为上颌窦底提升术。目前临床上广泛采用是包括自体骨移植在内的传统手术方式，但其不仅受到移植物来源稀少的限制，还会在术中对颌面部造成较大创伤，不利于组织塑性。随着近些年发展，组织工程学启示我们应用生物学材料结合细胞生长因子以激活干细胞增殖分化、促进新骨形成，改善骨量不足。 在生物学材料方面，水凝胶是在药物控释领域中性能较为理想、应用较广泛的药物载体。温敏型水凝胶可制成可注射型剂型，在液体状态时便于通过微型创口注射于形状不规则的组织缺损腔隙内、减小术中创伤；在达到适宜条件时凝结成胶状固体，即可达成良好的缓释效果，能够实现长期、持续、少量给药，使所包载药物能够稳定、持续、高效地在局部释放并发挥作用。 促进骨再生的生物因子方面，促红细胞生成素（erythropoietin，EPO）近年来被证实除促红细胞生成作用外，亦可通过促进BMMSC增殖、迁移、分化直接促进骨组织再生，并可同时通过调控干细胞免疫学行为、促进血管新生和神经再生等方面改善新骨形成环境从而间接参与骨再生。 基于以上背景，本研究分以下两个部分开展： 一、壳聚糖-明胶（CS-GEL）水凝胶的制备与最适各成分配比及pH值的确定 目的：将明胶引入壳聚糖-β-甘油磷酸钠体系制备出温敏型可注射水凝胶以改善胶体凝结速度，观察胶体性状，，并确定最适宜成分配比及凝胶条件。 方法：将壳聚糖、明胶、β-甘油磷酸钠充分混合，置于37℃条件下利用倒置法测得凝胶时间。分别改变壳聚糖：β-甘油磷酸钠：明胶成分配比、凝胶时pH值条件，观测对凝胶时间的影响。 结果：壳聚糖：β-甘油磷酸钠：明胶按10:2：（0.25~1.25）变化时，凝胶时间从(600±15)s增至(1200±15)s；当pH值是依次为6.5、7.0、7.5时凝胶时间依次为（960±15）s，（720±15）s，（540±15）s，而pH值低于6.5时无凝胶形成。 结论：制作CS-GEL水凝胶最适成分配比为壳聚糖：β-甘油磷酸钠：明胶10:2：0.25；CS-GEL水凝胶凝胶最适pH值为7.5。 二、载EPO CS-GEL水凝胶复合物体内促成骨作用的研究 目的：探究载EPO CS-GEL水凝胶对兔上颌窦提升术效果的促进 方法：将包载有EPO的CS-GEL水凝胶充填于兔一侧上颌窦窦底粘膜提升后与窦底骨壁的间隙内，另一侧间隙填充载有PBS的CS-GEL水凝胶作为空白对照。利用锥形束CT分别观测术后4w，8w，12w窦底骨量形成情况，利用Invivo5软件测量上颌窦底材料填充区域的密度；组织学切片观察提升区骨形成情况。 结果：锥形束CT显示，在4w，8w时，EPO/CS-GEL组窦底形成骨面积均明显大于PBS/CS-GEL组；在8w，12w时，EPO/CS-GEL组窦底填充区域的新生骨组织密度均分别大于各自对照组，具有统计学意义（P0.05）；组织学切片显示EPO/CS-GEL组较对照组形成骨量更多，组织修复更快。 结论：载EPO CS-GEL水凝胶复合物确有显著体内促骨再生能力。
【关键词】：骨再生 促红细胞生成素 骨组织工程 水凝胶
【学位授予单位】：吉林大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R765.9;R318.08
【目录】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-11
• 引言11-13
• 第1章 文献综述13-16
• 1.1 EPO 促成骨分化13-14
• 1.2 EPO 促进血管、神经再生14
• 1.3 EPO 促进免疫抑制14-16
• 1.3.1 BMMSC 的免疫学功能14-15
• 1.3.2 EPO 对 BMMSC 免疫学功能的调节15-16
• 第2章 壳聚糖-明胶水凝胶的制备与各成分配比的确定16-21
• 2.1 材料及方法16-18
• 2.1.1 实验材料与仪器16-17
• 2.1.2 CS-GEL 水凝胶复合物各配制成分的制备与纯化17
• 2.1.3 CS-GEL 水凝胶复合物的制备与性状观察、凝胶时间的测定及影响因素17-18
• 2.2 结果18-19
• 2.2.1 CS-GEL 水凝胶化过程及性状观察18
• 2.2.2 不同明胶体积用量对 GT 的影响18-19
• 2.2.3 不同 pH 值对 GT 的影响19
• 2.3 讨论19-21
• 第3章 载EPO CS-GEL 水凝胶复合物体内促成骨作用的研究21-30
• 3.1 材料与方法21-23
• 3.1.1 实验材料与仪器21-22
• 3.1.2 实验动物22
• 3.1.3 实验分组22
• 3.1.4 构建兔上颌窦提升模型22-23
• 3.1.5 CBCT 图像分析23
• 3.1.6 组织学分析23
• 3.1.7 兔血常规的变化23
• 3.2 结果23-28
• 3.2.1 可注射型载 EPO CS-GEL 水凝胶用于上颌窦提升术后的CBCT 表现23-25
• 3.2.2 上颌窦底骨密度值的测定25
• 3.2.3 组织学形态观察25-27
• 3.2.4 术后兔血常规改变27-28
• 3.3 讨论28-30
• 第4章 结论30-31
• 参考文献31-36
• 作者简介及在学期间所取得的科研成果36-37
• 致谢37

【参考文献】

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1 顾其胜;陶伟栋;蒋丽霞;;壳聚糖基复合材料类新型生物医用材料[J];上海生物医学工程;2007年01期

本文编号：890215