缺血预处理对小鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用研究

发布时间：2018-07-03 16:07

  本文选题：缺血再灌注损伤 + 缺血预处理　； 参考：《南方医科大学》2017年硕士论文

【摘要】：近年来,随着动脉搭桥术、溶栓疗法、心脏外科体外循环、经皮腔内冠脉血管成形术等方法的建立和推广应用,使得组织器官缺血后得到血液再灌注。多数情况下,缺血再灌注的器官能得到恢复,损伤的结构能得到修复,患者能够恢复健康;但有时缺血再灌注,不仅不能使组织、器官功能恢复,反而加重组织、器官的功能障碍和结构损伤。这种在缺血基础上恢复血流后组织损伤反而加重,甚至发生不可逆性损伤的现象称为缺血再灌注损伤。缺血预处理是指心脏在经历了一次或者多次的短暂缺血后,再进行较长时间的缺血再灌注时,会减轻心肌受损的现象。缺血预处理能够减少心肌梗死面积,改善心肌抑顿,减轻缺血再灌注后引起的心律失常等,改善心肌梗死病人的愈后。本研究通过建立C57/B6雄性小鼠心肌缺血再灌注(ischemia-reperfusion,I/R)模型,探讨缺血预处理对小鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用。首先,将36只6-8周C57/B6雄性小鼠随机分为3组(n=12):假手术组(Sham组)、缺血再灌注组(I/R组)及缺血预处理组(Ipost组)。然后,利用苏木素伊红(hematoxylin and eosin,HE)染色、脱氧三磷酸尿苷缺口末端标记(TdT-mediated dUTP-biotin nick end labeling,Tunel)染色、免疫组化及蛋白质印迹方法,对比三组小鼠的心肌病理学改变、心肌细胞凋亡情况、梗死心肌边缘区微血管密度(microvessel density,MVD)的变化,以及肿瘤相关蛋白 PTEN(phosphatase and tensin homolog deleted on chromosometen,即人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因的编码产物)、自噬相关蛋白LC3Ⅰ/Ⅱ和腺苷酸活化蛋白激酶(5-AMP activated protein kinase,AMPK)的表达水平。结果显示:I/R组心肌组织细胞水肿、炎症细胞浸润等组织病理学变化情况较Sham组明显,而Ipost组中的情况相比I/R组有明显改善;同时,Ipost组心肌凋亡率高于Sham组,但显著低于I/R组(P0.01);Ipost组梗死心肌边缘区域的微血管密度显著高于I/R组(P0.01)。此外,缺血预处理后,PTEN的表达水平降低,AMPK磷酸化水平以及LC3Ⅰ/Ⅱ蛋白的表达水平均增强。由此可见,缺血预处理可减轻I/R损伤,减少心肌梗死面积,减轻心肌水肿,对心肌细胞有明显的保护作用,其机制可能与梗死心肌中PTEN表达下调、AMPK磷酸化水平增强、心肌细胞自噬增强和凋亡减少有关。在心脏长时间的缺血再灌注前,进行缺血预处理,能够保护心脏。其机制可能是由于缺血预处理抑制了PTE 基因的表达,引起AMPK磷酸化增强及心肌细胞自噬增强,但其中的PTEN与AMPK的具体分子机制仍有待进一步研究。
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本文编号：2094202