瑞芬太尼预处理促进小鼠70%肝脏切除术后的肝再生过程及其机制探究
发布时间：2021-01-08 14:40
背景及研究目的:瑞芬太尼作为临床麻醉中常用的阿片类镇痛类药物,众多研究已经证实其在调节机体的免疫和炎症反应中的作用。本课题组的前期研究发现,β-arrestin2作为G蛋白偶联受体的重要负调节因子,介导TLR4通路从而参与瑞芬太尼的肝保护作用。本研究的目的是探究瑞芬太尼预处理对于70%部分肝脏切除术诱导的肝再生过程的作用及其具体机制,为临床瑞芬太尼的围术期应用提供更多的依据及支持。方法:1.瑞芬太尼预处理对于70%部分肝脏切除术后肝再生过程的影响方法:本实验动物为6-8周龄雄性SPF级C57BL/6J小鼠,分别予以30μg/kg瑞芬太尼或同等剂量生理盐水腹腔注射预处理后,在70%部分肝脏切除术后6h、24h、36h、48h、120h、192h计算各组肝体比,Ki-67免疫组化染色反映肝脏细胞再生情况,HE染色、TUNEL染色及肝功能检测反映肝脏损伤程度,RTPCR检测糖异生及脂肪酸合成过程中重要因子、肝再生过程的部分相关细胞因子的mRNA水平,Western blot检测120h肝脏中功能性Yap的蛋白表达。在离体细胞水平上,给予不同浓度的瑞芬太尼处理小鼠原代肝细胞,经正常培养或缺氧复...
【文章来源】：上海交通大学上海市 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：83 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
瑞芬太尼预处理对于小鼠70%部分肝脏切除术后不同时间点肝再生的影响
上海交通大学硕士学位论文26呈现嗜酸状态，但肝窦的结构并没有明显改变，也并未出现明显的坏死区域。不同时间点两组间的比较并没有发现明显的差异。但从苏木紫着色情况来看，瑞芬太尼组的肝脏在36h已有部分细胞核恢复了其嗜碱性从而被着色，而生理盐水对照组120h才出现明显的核结构。TUNEL染色结果显示（图2B），70%肝脏切除术后两组肝脏均未发生明显的细胞凋亡。图2瑞芬太尼预处理对于小鼠70%肝脏切除术后不同时间点肝损伤的影响Fig.2Effectofremifentanilpreconditioningonmicehepaticinjuryatdifferenttimepointsafter70%partialhepatectomyA：小鼠70%肝脏切除术后不同时间点再生肝脏HE染色结果。B：小鼠70%肝脏切除术后不同时间点再生肝脏TUNEL染色结果及其统计图。红色箭头指向TUNEL阳性细胞，200×。图中数值用均数±标准误（MEAN±SEM）表示。Control：生理盐水预处理组，Remifentanil：瑞芬太尼预处理组。1.3.2.2：瑞芬太尼预处理对于小鼠70%肝脏切除术后肝功能的影响70%肝脏切除术后6h、24h、36h、48h、120h、192h肝功能生化检测结果显示，在肝切早期，由于剩余肝脏并不能完全代偿切除的70%肝脏的功能，转氨酶（图3A，图3B）及总胆红素（图3C）水平均显著升高，其中转氨酶水平超过2000U/L。与对照组相比，瑞芬太尼预处理组的肝功能并没有显著改善，可能与肝脏损伤程度太重，转氨酶水平过高有关。
上海交通大学硕士学位论文27图3瑞芬太尼预处理对于小鼠70%肝脏切除术后不同时间点肝功能的影响Fig.3Effectofremifentanilpreconditioningonmiceliverfunctionatdifferenttimepointsafter70%partialhepatectomyA：小鼠70%肝脏切除术后不同时间点血浆AST水平。B：小鼠70%肝脏切除术后不同时间点血浆ALT水平。C：小鼠70%肝脏切除术后不同时间点血浆T-Bil水平，*P＜0.05，与该时间点生理盐水对照组相比。图中数值用均数±标准误（MEAN±SEM）表示；Control：生理盐水预处理组；Remifentanil：瑞芬太尼预处理组。1.4瑞芬太尼预处理对于70%肝切除后小鼠肝脏代谢的影响1.4.1材料与方法1.4.1.1实验动物本实验选取6-8周龄雄性SPF级C57BL/6J小鼠，实验动物来源为上海交通大学医学院实验动物中心，且经过上海交通大学医学院的实验动物管理机构许可。在予以不同的实验处理前，动物以6只/笼饲养于独立通风笼盒系统，饲养5天以上以适应饲养环境。饲养标准遵从实验动物环境标准条件，12小时昼夜明暗节律，动物房和实验室的温度保持在23-25℃，相对湿度保持在50%左右。动物给予SPF级标准动物饲料喂养，自由进食进水。所有实验动物饲养及实验操作均遵循人道主义原则。1.4.1.2主要实验试剂及耗材
【参考文献】：
期刊论文
[1]瑞芬太尼预处理对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的影响及机制[J]. 赵鸽,陈正春,申新,陈亚丽,吕毅. 南方医科大学学报. 2011(12)
[2]Effect of liver regeneration after partial hepatectomy and ischemia-reperfusion on expression of growth factor receptors[J]. P Baier,G Wolf-Vorbeck,S Hempel,UT Hopt,E von Dobschuetz. World Journal of Gastroenterology. 2006(24)
本文编号：2964778
【文章来源】：上海交通大学上海市 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：83 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
瑞芬太尼预处理对于小鼠70%部分肝脏切除术后不同时间点肝再生的影响
上海交通大学硕士学位论文26呈现嗜酸状态，但肝窦的结构并没有明显改变，也并未出现明显的坏死区域。不同时间点两组间的比较并没有发现明显的差异。但从苏木紫着色情况来看，瑞芬太尼组的肝脏在36h已有部分细胞核恢复了其嗜碱性从而被着色，而生理盐水对照组120h才出现明显的核结构。TUNEL染色结果显示（图2B），70%肝脏切除术后两组肝脏均未发生明显的细胞凋亡。图2瑞芬太尼预处理对于小鼠70%肝脏切除术后不同时间点肝损伤的影响Fig.2Effectofremifentanilpreconditioningonmicehepaticinjuryatdifferenttimepointsafter70%partialhepatectomyA：小鼠70%肝脏切除术后不同时间点再生肝脏HE染色结果。B：小鼠70%肝脏切除术后不同时间点再生肝脏TUNEL染色结果及其统计图。红色箭头指向TUNEL阳性细胞，200×。图中数值用均数±标准误（MEAN±SEM）表示。Control：生理盐水预处理组，Remifentanil：瑞芬太尼预处理组。1.3.2.2：瑞芬太尼预处理对于小鼠70%肝脏切除术后肝功能的影响70%肝脏切除术后6h、24h、36h、48h、120h、192h肝功能生化检测结果显示，在肝切早期，由于剩余肝脏并不能完全代偿切除的70%肝脏的功能，转氨酶（图3A，图3B）及总胆红素（图3C）水平均显著升高，其中转氨酶水平超过2000U/L。与对照组相比，瑞芬太尼预处理组的肝功能并没有显著改善，可能与肝脏损伤程度太重，转氨酶水平过高有关。
上海交通大学硕士学位论文27图3瑞芬太尼预处理对于小鼠70%肝脏切除术后不同时间点肝功能的影响Fig.3Effectofremifentanilpreconditioningonmiceliverfunctionatdifferenttimepointsafter70%partialhepatectomyA：小鼠70%肝脏切除术后不同时间点血浆AST水平。B：小鼠70%肝脏切除术后不同时间点血浆ALT水平。C：小鼠70%肝脏切除术后不同时间点血浆T-Bil水平，*P＜0.05，与该时间点生理盐水对照组相比。图中数值用均数±标准误（MEAN±SEM）表示；Control：生理盐水预处理组；Remifentanil：瑞芬太尼预处理组。1.4瑞芬太尼预处理对于70%肝切除后小鼠肝脏代谢的影响1.4.1材料与方法1.4.1.1实验动物本实验选取6-8周龄雄性SPF级C57BL/6J小鼠，实验动物来源为上海交通大学医学院实验动物中心，且经过上海交通大学医学院的实验动物管理机构许可。在予以不同的实验处理前，动物以6只/笼饲养于独立通风笼盒系统，饲养5天以上以适应饲养环境。饲养标准遵从实验动物环境标准条件，12小时昼夜明暗节律，动物房和实验室的温度保持在23-25℃，相对湿度保持在50%左右。动物给予SPF级标准动物饲料喂养，自由进食进水。所有实验动物饲养及实验操作均遵循人道主义原则。1.4.1.2主要实验试剂及耗材
【参考文献】：
期刊论文
[1]瑞芬太尼预处理对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的影响及机制[J]. 赵鸽,陈正春,申新,陈亚丽,吕毅. 南方医科大学学报. 2011(12)
[2]Effect of liver regeneration after partial hepatectomy and ischemia-reperfusion on expression of growth factor receptors[J]. P Baier,G Wolf-Vorbeck,S Hempel,UT Hopt,E von Dobschuetz. World Journal of Gastroenterology. 2006(24)
本文编号：2964778
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