Gefitinib抑制EGFR信号通路影响大鼠长骨骨折愈合机制的初步研究

发布时间：2024-05-17 20:58

　　目的对比大鼠长骨骨外膜间充质干细胞(PSCs)、骨内膜间充质干细胞(ESCs)和骨髓间充质干细胞(BMSCs)在骨折后骨愈合过程中分化、增殖和凋亡的生物学差异,并探讨吉非替尼(Gefitinib)抑制EGFR信号通路后对大鼠长骨PSCs、ESCs和BMSCs生物学功能的影响的差异。方法取健康雄性4周龄SD大鼠,右下肢股骨骨折模型造模成功后随机分为2组:实验组予以EGFR信号通路抑制剂吉非替尼100mg/Kg/D溶于0.2g/40ml甲基纤维素灌胃,对照组予以等剂量的甲基纤维素灌胃。术后1w取双侧股骨及胫骨,分别分离提取PSCs、ESCs和BMSCs,通过克隆形成能力CFU检测、细胞表面抗原CD29、CD90、CD34、CD45的表达及多向分化(成骨、成软骨、成脂)能力鉴定其干细胞属性。PCR检测成骨分化相关基因(osteoca1cin、bsp、osterix、RUNX2)、成软骨分化相关基因(aggrecan,Col2a1,Sox9)、成脂分化相关基因(1p1,pparγ,cebpa)、细胞周期抑制因子相关基因(p15,p16,p21,p27)以及凋亡相关基因(bcl2,bax,cas...

【文章页数】：77 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图２．?ＣＦＵ检测的结晶紫染色：（Ａ）结晶紫染色；（Ｂ）ＣＦｉｒ细胞数；（Ｃ）ＣＦＵ＇颗粒直径

?显较对照组小（见图１．Ｃ）。然后再进行结晶紫染色，可见较培养皿中形成较黑??色颗粒沉淀更大蓝染颗粒沉淀（见图２．Ａ），显微镜下比较ＰＳＣｓ、ＥＳＣｓ和ＢＭＳＣｓ??形成蓝染颗粒沉淀ｃＦｉｒ细胞数及沉淀直径大小，ｐｓｃｓ颗粒中ｃｆｉｔ细胞数明显较??ＥＳＣｓ和ＢＭＳＣｓ大，ＥＳＣ....

图３?Ｖｏｎ?ｋｏｓｓａ染色观察（Ｘ２００）??Ｆｉｇｕｒｅ?３?Ｏｂｓｅｒｖａｓｉｏｎ?ｏｆ?Ｖｏｎ?ｋｏｓｓａ?ｓｔａｉｎｉｎｇ（?ｘ２〇〇）??

ｖｏｎ?Ｋｏｓｓａ染色、阿尔新蓝染色和油红０染色，倒置显微镜下观察各样本分化情??况。Ｖｏｎ?ｋｏｓｓａ染色后镜下可见矿化结节形成ＰＳＣｓ最大最明显，ＥＳＣｓ次之，ＢＭＳＣｓ??最小，实验组均较对照组矿化结节更大更明显（见图３）。阿尔新蓝染色可见细??胞内淡蓝色颗粒ＰＳＣｓ最多最....

图４阿尔新蓝染色观察（Ｘ?１００）??Ｆｉｇｕｒｅ?４?Ｏｂｓｅｒｖａｓｉｏｎ?ｏｆ?ａｌｃｉａｎ?ｂｌｕｅ?ｓｔａｉｎｉｎｇ（?ｘ?１００）??

??淡蓝色颗粒更多更明显（见图４）。油红０染色可见细胞内红色颗粒ＰＳＣｓ最多??最大，ＥＳＣｓ次之，ＢＭＳＣｓ最少，实验组均较对照组红色颗粒更多更明显（见图５）。??ＰＳＣｓ?ＥＳＣｓ?ＢＭＳＣｓ??实验组％?ｉ??？ｊ，?＼?ｔ?ＳＮ?Ｌ，?Ｈ，?．?＊?ｒＣ?ｋ‘?■?＇ｉ?....

图５油红０染色观察（Ｘ?１００）??Ｆｉｇｕｒｅ?５?Ｏｂｓｅｒｖａｓｉｏｎ?ｏｆ?Ｏｉｌ?ｒｅｄ?Ｏ?ｓｔａｉｎｉｎｇ（?ｘｌ〇〇）??ｊ??

?淡蓝色颗粒更多更明显（见图４）。油红０染色可见细胞内红色颗粒ＰＳＣｓ最多??最大，ＥＳＣｓ次之，ＢＭＳＣｓ最少，实验组均较对照组红色颗粒更多更明显（见图５）。??ＰＳＣｓ?ＥＳＣｓ?ＢＭＳＣｓ??实验组％?ｉ??？ｊ，?＼?ｔ?ＳＮ?Ｌ，?Ｈ，?．?＊?ｒＣ?ｋ‘?■?＇ｉ?｜....

本文编号：3975990