SOCS3敲除对小鼠脊髓损伤后小胶质细胞/巨噬细胞极化作用及功能恢复的影响

发布时间：2024-10-02 23:59

　　目的：脊髓损伤引起的炎症反应是造成脊髓功能难以恢复的重要原因，而损伤局部小胶质细胞和外周浸润的巨噬细胞是神经系统固有免疫-炎症反应的基本组成成分。研究表明,SOCS3基因参与多种体内炎症反应,并影响脊髓损伤功能预后。但SOCS3对于脊髓损伤后小胶质细胞/巨噬细胞炎症反应的作用尚不明确。本研究旨在利用神经系统或骨髓源细胞谱系条件性敲除SOCS3基因的小鼠，研究基因敲除对脊髓损伤后小胶质细胞/巨噬细胞极化作用的影响,以及对损伤脊髓髓鞘再生、轴突生长及功能恢复等方面的作用并探讨其机制。方法：(1)通过鼠尾鉴定的方法培育筛选出基因型为Socs3fl/fl Nes ere(神经系统条件性敲除socs3,40只)、Socs3fl/fl LysM ere(骨髓源细胞谱系条件性敲除Socs3,40只)及Socs3fl(无socs3敲除,40只)的小鼠。分别为作为敲除组1,敲除组2和对照组。钳夹法制作脊髓损伤模型,在损伤后1、3、7、14天取损伤组织。荧光定量RT-PCR法检测各时间点巨噬细胞分型标志分子及SOCS3信号通路分子的基因表达：免疫荧光共染色法检测脊髓损伤部位巨噬细胞M1及M2分型标志蛋白，以...

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【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图１．鼠尾基因的鉴定和分组方法示意图（Ｍａｒｋｅｒ略）??－－－

本文从略。ＰＣＲ体系中使用Ｐｒｅｍｉｘ?Ｔａｑ？?（ＴａＫａＲａ?Ｔａｑ？?Ｖｅｒｓｉｏｎ?２．０??ｐｌｕｓ?ｄｙｅ）ＰＣＲ预混试剂。根据发光呈像系统显示ＰＣＲ结果分析小鼠基因型（如??图１），同一动物鉴定为双链ｓｏｃｓ３－ｌｏｘｐ且Ｎｅｓ－ｃｒｅ阳性时，其基因型为５ｂｃｓ沪?....

图６脊髓损伤后３天Ｓｏｃｓ３表达情况（免疫巧光染色，Ｘ２０）??Ａ、Ｂ、Ｃ分别为脊粗损伤后３天对照组、敲除组１、敲除组２中Ｓｏｃｓ３染色（缘色）结??

ｒｇｉｎａｓｅｌ、ＣＤ２０６，绿色），Ｍｌ标志物（０）８６、ＣＤ１６，绿色）的免疫巧光共染色Ａ－Ｄ为分别为对照组中比ａｌ与Ａｒｇｉｎａｓｅｌ、ＣＤ２０６、ＣＤ８６、ＣＤ１６巧染，Ｅ－Ｈ为中上述抗体染色结果，Ｉ－Ｌ为敲除组２中上述抗体染色结果。标尺＝１００?Ｍ?ｍ。Ｍ－后３、７、１....

图７脊髓损伤后１４周皮质脊髓束的巧死与出芽??Ａ、Ｂ分别为对照组小鼠及巧除组小鼠ＣＳＴ损伤段脊巧，红色为ＣＳＴ示踪情况，绿色为??ＧＦＡＰ染色，用Ｗ确定损伤近端胶质巧痕与损伤核也区界限（虚线所示）

图７脊髓损伤后１４周皮质脊髓束的巧死与出芽??Ａ、Ｂ分别为对照组小鼠及巧除组小鼠ＣＳＴ损伤段脊巧，红色为ＣＳＴ示踪情况，绿色为??ＧＦＡＰ染色，用Ｗ确定损伤近端胶质巧痕与损伤核也区界限（虚线所示）。如图所见??化Ｓ－ＳＯＣＳ３－／－组神经束与损伤界限距离缩短。左俩均为头侧，上方为....

图８损伤后１４周脊巧卢卡斯快蓝染色结果??Ａ为对照纪小鼠，Ｂ为敲除组小鼠，箭头指示损伤中必背侧残存的髓销

染范围大于对照组，损伤灶蓝染缺失区域较对照组明显巧少。损伤中屯、背側有连??续性蓝染区域自近端贯通至远端。说明敲除组残存及再生的髓销较对照组明显增??ｈ?多。具体见图８．??Ｉ??

本文编号：4006509