聚乙二醇水凝胶膜为载体的人角膜上皮细胞原代培养研究

发布时间：2017-12-29 01:09

  本文关键词：聚乙二醇水凝胶膜为载体的人角膜上皮细胞原代培养研究　出处：《眼科》2016年06期 　论文类型：期刊论文

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【摘要】：目的观察人角膜上皮细胞(corneal limbal epithelial cells,CLEC)的生物学特性,探讨CLEC在普通培养皿和聚乙二醇水凝胶膜(poly(ethylene glycol)-based hydrogel films,PHF)上的增殖率差异。设计实验研究。研究对象人角膜上皮细胞。方法采用组织块培养法体外扩增CLEC,待细胞生长至指数生长期,分别种植于普通培养皿和PHF上,倒置显微镜下观察培养细胞的生长特点,利用免疫荧光对其鉴定,利用CCK-8比色法观察两组细胞相对增殖率(relative growth rate,RGR)的差异。主要指标光镜下CLEC的生长,AE1染色,CCK-8比色法的吸光度(optical density,OD)值。结果光镜下可见CLEC在普通培养皿和PHF上均能移行扩增、融合成片,在PHF上的生长速度与普通培养皿组相近。两组细胞AE1荧光染色均呈阳性,PHF组阳性率(73.26%±8.84%)与普通培养皿组(70.84%±3.51%)基本相同。PHF组在12 h(0.89±0.06)、24 h(1.13±0.10)、48 h(1.24±0.03)的OD值与普通培养皿组(0.89±0.03、1.08±0.04、1.28±0.09)差异无统计学意义(P=0.79,0.36,0.76)。PHF组细胞在12 h(99.12%±4.81%)、24 h(103.74%±5.55%)、48 h(97.83%±13.37%)的RGR均大于75%,各时间点间差异无统计学意义(P=0.37,0.90)。结论PHF可以作为体外扩增角膜上皮细胞的良好载体。
[Abstract]:......
【作者单位】： 哈尔滨医科大学附属第一临床医院眼科;哈尔滨医科大学附属第二临床医院内分泌科;山东省青岛市胶州市人民医院心内科;
【基金】：黑龙江省杰出青年科学基金(JC2016019) 黑龙江省属科研院所自拟课题项目(201608)
【分类号】：R772.2
【正文快照】： 角膜缘干细胞(limbal stem cells,LSC)是角膜上皮细胞(corneal limbal epithelial cells,CLEC)再生的源泉,若手术、外伤、感染等因素损伤了LSC,出现角膜缘干细胞缺陷,则会导致角膜完整性丧失和透明度降低,最终导致角膜结膜化、血管化、眼表慢性炎症等改变[1]。角膜干细胞移植

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