姜黄素对碱烧伤诱导的兔角膜新生血管的抑制作用及其机制的探讨
发布时间:2018-02-15 14:34
本文关键词: 姜黄素 碱烧伤 新生血管 机制 信号传导 出处:《安徽医科大学》2017年硕士论文 论文类型:学位论文
【摘要】:目的观察姜黄素对兔眼角膜碱烧伤后角膜新生血管(corneal neovascularization,CNV)的抑制作用,初步探讨姜黄素抑制角膜新生血管的作用机制,为将来姜黄素应用于临床奠定理论基础。方法取健康,体重2.0-2.5kg的成年雄性日本大耳兔48只,采用浸润1mol/L氢氧化钠的滤纸贴附右眼角膜中央1分钟的方法制作兔眼角膜碱烧伤模型。将造模成功的大耳兔随机分为A组(二甲基亚砜(DMSO)对照组)、B组(40umol/L姜黄素组)、C组(80umol/L姜黄素组)和D组(160umol/L姜黄素组),每组12只(12眼),右眼分别点相对应的药物,1滴/次,4次/日,连续用药14天。(1)采用眼前节照相仪观察兔眼角膜新生血管情况并对兔眼碱烧伤后的第2天、4天、7天、14天的角膜进行拍照,记录CNV长度和计算CNV面积。(2)分别于碱烧伤后2天、4天、7天、14天随机从A组、B组、C组、D组兔中抽取3只,抽取房水,采用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测各组房水中VEGF、4EBP1因子的蛋白含量;分别于碱烧伤后7天、14天随机从A组、B组、C组、D组兔中抽取3只,处死后取角膜,采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测各组角膜组织中4EBP1、P70S6K、m TOR的m RNA的相对表达量。(3)采用SPSS23.0软件完成统计分析,计量资料的统计学描述采用均数±标准差表示,行单因素方差分析,P0.05为差异有统计学意义。结果(1)兔眼角膜碱烧伤后2天,四组均表现为结膜混合充血,碱烧伤区角膜灰白色水肿,水肿后方虹膜纹理模糊不清,角巩膜缘血管扩张充血,未见角膜新生血管;兔眼角膜碱烧伤后4天,四组结膜充血开始减轻,烧伤区角膜周边水肿明显,周边角膜可见新生血管长入。实验组(B组、C组、D组)与对照组(A组)相比平均角膜新生血管面积差异无统计学意义(P0.05);兔眼角膜碱烧伤后7天,对照组(A组)结膜充血及角膜水肿均减轻,角膜新生血管生长旺盛,管腔粗大;实验组(B组、C组、D组)结膜充血较对照组明显减轻,新生血管自角膜缘侵入角膜,但是生长较对照组缓慢,血管稀疏较细。实验组(B组、C组、D组)与对照组(A组)相比平均角膜新生血管面积差异有统计学意义(P0.05),并且随着姜黄素浓度的增加,平均角膜新生血管面积逐渐减小;兔眼角膜碱烧伤后14天,对照组(A组)新生血管密集粗大,呈网状布满整个角膜;实验组(B组、C组、D组)新生血管由角膜四周长入烧伤区,生长缓慢,角膜周边的细小血管开始退化,与对照组(A组)相比,角膜新生血管明显短且稀疏。实验组(B组、C组、D组)与对照组(A组)相比平均角膜新生血管面积差异有统计学意义(P0.05),并且随着姜黄素浓度的增加,平均角膜新生血管面积逐渐减小。(2)兔眼角膜碱烧伤后7天、14天时,实验组(B组、C组、D组)与对照组(A组)相比,房水中的4EBP1、VEGF蛋白的表达量的差异具有统计学意义(P0.05),随着姜黄素浓度的增高VEGF,4EBP1蛋白的表达量依次降低,行皮尔逊相关性分析发现房水中4EBP1与VEGF的蛋白表达呈线性正相关。相关系数r在A组为0.969,B组为0.803,C组为0.67,D组为0.972(在0.05级别,相关性显著)。(3)兔眼角膜碱烧伤后7天、14天,实验组(B组、C组、D组)与对照组(A组)相比,角膜组织中m TOR、4EBP1、P70S6K在m RNA水平的表达差异有统计学意义(P0.05),并且随着姜黄素浓度的增高m TOR、4EBP1、P70S6K在m RNA水平的表达量依次降低。结论1.姜黄素对兔眼角膜碱烧伤后CNV的生长具有明显的抑制作用,并且随着姜黄素浓度的增加抑制作用增强;2.姜黄素能降低房水中VEGF蛋白的表达;3.姜黄素对VEGF的抑制作用可能是通过抑制m TOR信号传导通路来发挥作用。
[Abstract]:Objective To observe the effect of curcumin on rabbit corneal alkali burn induced corneal neovascularization (corneal neovascularization, CNV) the inhibitory effect, to explore the mechanism of curcumin inhibition of corneal neovascularization, for future clinical application of curcumin and laid a theoretical basis. Methods healthy adult male, weight 2.0-2.5kg 48 Japan rabbits, rabbit model of corneal alkali burn production method by infiltrating 1mol/L sodium hydroxide filter paper attached to the right of central corneal 1 minutes. The successful model of the rabbits were randomly divided into A group (two dimethyl sulfoxide (DMSO) control group), B group (40umol/L group, C group (curcumin) 80umol/L curcumin group) and D group (160umol/L group, curcumin), 12 rats in each group (12 eyes), respectively, corresponding to the right drug, 1 drops / times, 4 times / day, 14 days of continuous use. (1) using anterior segment photography for observing rabbit corneal neovascularization of rabbit eyes after alkali burn 2澶,
本文编号:1513493
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