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干扰胰岛素样生长因子结合蛋白相关蛋白1表达对鼻咽癌细胞生物学行为的影响

发布时间:2018-02-24 23:25

  本文关键词: 鼻咽肿瘤 胰岛素样生长因子结合蛋白质类 RNA干扰 细胞生物学 细胞外调节激酶 出处:《肿瘤》2017年01期  论文类型:期刊论文


【摘要】:目的 :采用RNA干扰技术抑制胰岛素样生长因子结合蛋白相关蛋白1(insulin-like growth factor-binding protein related protein 1,IGFBP-rP 1)表达后,观察鼻咽癌细胞系CNE1和CNE-2Z生物学行为的变化,并探讨其可能的分子机制。方法 :通过免疫组织化学法检测25例鼻咽癌组织和22例慢性鼻咽炎组织中IGFBP-r P1蛋白的表达情况。将针对IGFBP-r P1基因的特异性si RNA(即IGFBP-r P1 si RNA)及其阴性对照si RNA分别转染鼻咽癌CNE1和CNE-2Z细胞,然后采用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法鉴定IGFBPr P1基因的沉默效果,并采用蛋白印迹法检测各组细胞中总的细胞外调节激酶(extracellular regulated kinase,ERK)和磷酸化ERK(phosphorylated ERK,p-ERK)的表达。采用CCK-8法、细胞划痕愈合实验和Transwell小室法分别检测干扰IGFBP-r P1基因表达对鼻咽癌CNE1和CNE-2Z细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。结果 :鼻咽癌组织中IGFBP-r P1蛋白的表达水平明显高于慢性鼻咽炎组织(P0.05)。IGFBP-r P1 si RNA转染后,鼻咽癌CNE1和CNE-2Z细胞中IGFBP-r P1基因的表达均被明显抑制(P值均0.05),细胞的增殖、迁移和侵袭能力均明显降低(P值均0.05);同时2种细胞中p-ERK表达水平明显下调(P值均0.01),而总ERK的表达水平不变(P值均0.05)。结论 :下调IGFBP-r P1基因表达可能通过调控ERK通路,抑制鼻咽癌细胞的增殖、迁移及侵袭。提示IGFBP-r P1有望成为鼻咽癌基因治疗的一个新靶点。
[Abstract]:Objective: to observe the biological behavior of nasopharyngeal carcinoma (NPC) cell line CNE1 and CNE-2Z after inhibiting the expression of insulin-like growth factor-binding protein related protein 1IGFBP-rP1 by RNA interference. Methods: the expression of IGFBP-r P1 protein in 25 cases of nasopharyngeal carcinoma and 22 cases of chronic nasopharyngitis was detected by immunohistochemical method. The specific siRNAs specific to IGFBP-r P1 gene (IGFBP-r) were used to detect the expression of P1 protein in the tissues of nasopharyngeal carcinoma (NPC) and chronic nasopharyngitis (22 cases). P1 siRNAs and si RNA were transfected into nasopharyngeal carcinoma (NPC) CNE1 and CNE-2Z cells, respectively. Then real-time fluorescence quantitative PCR and Western blot were used to determine the silencing effect of IGFBPr P1 gene. The expression of total extracellular regulated kinase (ERK) and phosphorylated ERK(phosphorylated ERK (p-ERK) were detected by Western blot. Cell scratch healing assay and Transwell chamber assay were used to detect the proliferation of nasopharyngeal carcinoma CNE1 and CNE-2Z cells by interfering IGFBP-r P1 gene expression. Results: the expression of IGFBP-r P1 protein in nasopharyngeal carcinoma was significantly higher than that in chronic nasopharyngitis after transfection with P0.05. IGFBP-r P1 si RNA. The expression of IGFBP-r P1 gene in nasopharyngeal carcinoma (NPC) CNE1 and CNE-2Z cells was significantly inhibited by 0.05 P values, and the proliferation of NPC cells was observed. The expression level of p-ERK was decreased significantly in both cells, while the expression level of total ERK was unchanged (P = 0.05). Conclusion: down-regulation of IGFBP-r P1 gene expression may be by regulating the ERK pathway. The inhibition of proliferation, migration and invasion of nasopharyngeal carcinoma cells suggests that IGFBP-r P1 may be a new target for gene therapy of nasopharyngeal carcinoma.
【作者单位】: 重庆医科大学附属永川医院耳鼻咽喉-头颈外科;新疆巴音郭楞蒙古自治州人民医院耳鼻咽喉科;山东省立医院西院耳鼻咽喉科;
【基金】:重庆市永川区2013年科技计划项目(编号:Ycstc,2013nc8014) 重庆医科大学附属永川医院2013年度院内科研课题(编号:YJYB201309)~~
【分类号】:R739.63

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本文编号:1532154


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