MMP-8及MMP-9对角膜混浊度的影响

发布时间：2018-03-14 19:55

  本文选题：角膜基质　切入点：基质金属蛋白酶-8　出处：《郑州大学》2017年硕士论文　论文类型：学位论文

【摘要】：目的探讨MMP-8、MMP-9对角膜混浊度的影响;比较MMP-8及MMP-9对角膜基质胶原的破坏作用。方法选取角膜正常的C57BL/6J小鼠8只,共16只角膜,经腹腔麻醉后脱颈椎法处死,2 mm角膜环钻取中央角膜,用于体外实验。将角膜随机分4组,MMP-8组、MMP-9组为实验组,Assay Buffer组为阴性对照组,生理盐水组为空白对照组,分别加入到含100μL的20 ng/μL MMP-8、20 ng/μL MMP-9、Assay Buffer、生理盐水的96孔板中,36.5℃孵育24 h后取出,测定各个角膜的羟脯氨酸浓度;选取角膜正常的C57BL/6J小鼠30只,共60只角膜,用于体内实验。将小鼠分3组,MMP-8组、MMP-9组为实验组,生理盐水组为对照组,分别给予角膜基质内注射约10μL的20 ng/μL MMP-8、20 ng/μL MMP-9及生理盐水,分别于注射前(0 h)及注射后4、8、12、20、24 h进行混浊度评分、二次谐波扫描角膜基质信号强度,并于8 h、24 h分别经腹腔麻醉后脱颈椎法处死,取角膜进行羟脯氨酸浓度测定。结果体外实验中,实验组角膜羟脯氨酸浓度明显低于阴性对照组(F=451.492,P=0.000)及空白对照组(F=252.403,P=0.000),差异有统计学意义,MMP-8组角膜羟脯氨酸浓度明显低于MMP-9组(F=55.184,P=0.002),差异有统计学意义。体内实验中,0 h实验组与对照组角膜混浊度无明显差异(χ2=0.000,P=1.000)。4、8、12、20、24 h实验组角膜较对照组角膜明显混浊,结果有统计学差异(P0.05),MMP-8组较MMP-9组角膜混浊度无明显差异(P0.05)。0 h二次谐波扫描实验组与对照组角膜基质信号强度无明显差异(P0.05)。4、8、12、20、24 h,实验组角膜基质信号强度均明显低于对照组,结果有统计学差异(P0.05),MMP-8组与MMP-9组相比较,结果无明显统计学差异(P0.05)。8 h对小鼠角膜取材进行羟脯氨酸浓度测定,实验组角膜羟脯氨酸浓度明显低于对照组,差异有统计学意义(F=17.877,P0.001),MMP-8组与MMP-9组相比较,结果无明显统计学差异(P0.05)。24 h对小鼠角膜取材进行羟脯氨酸浓度测定,实验组角膜羟脯氨酸浓度明显低于对照组,差异有统计学意义(F=41.400,P0.001),MMP-8组与MMP-9组相比较,结果无明显统计学差异(P0.05)。MMP-8组SHG角膜基质信号强度与角膜混浊度临床评分之间呈明显负相关(rs=-0.511,P0.001),MMP-9组SHG角膜基质信号强度与角膜混浊度临床评分之间呈明显负相关(rs=-0.613,P0.001)。结论MMP-8及MMP-9可降解角膜基质中的胶原纤维,导致角膜基质胶原纤维排列紊乱,角膜混浊度升高;体外实验中,同一质量浓度的MMP-9较MMP-8有更强的降解角膜基质胶原的能力;在体实验中,角膜基质注射条件下,同一质量浓度MMP-9与MMP-8降解胶原的能力无明显差异。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of MMP-8 / MMP-9 on corneal turbidity and to compare the effect of MMP-8 and MMP-9 on corneal stromal collagen destruction. Methods eight C57BL / 6J mice with normal cornea were selected and 16 corneas were obtained. After abdominal anaesthesia, the central cornea was removed from the cervical vertebrae with 2 mm cornea for in vitro experiment. The cornea were randomly divided into 4 groups: MMP-8 group, MMP-9 group as negative control group, normal saline group as blank control group, and MMP-9 group as negative control group. 20 ng/ / L MMP-8 / 20 ng/ / L MMP-9Assay buffer containing 100 渭 L was added respectively. After incubation at 36.5 鈩，

本文编号：1612673