喉癌组织中NDRG1、NDRG2基因启动子区CpG岛甲基化状态及其蛋白表达

发布时间：2018-05-24 12:12

  本文选题：喉癌 + 候选抑癌基因　； 参考：《河北医科大学》2012年硕士论文

【摘要】：目的：喉癌（laryngocarcinoma）是耳鼻咽喉－头颈外科常见的恶性肿瘤之一，约占全身恶性肿瘤的1-5%，近年来发病率升高。喉癌以喉鳞状细胞癌最多见，约占90%。喉癌的发生涉及遗传学和表观遗传学两大机制。伴随着分子生物技术的发展，从分子水平上认识和了解喉癌越来越得到人们的重视。其中对表观遗传学的改变尤其是DNA启动子区甲基化的研究已经成为热点。NDRG1、NDRG2基因是候选抑癌基因，他们在喉癌组织中的作用尚未明确。本课题通过研究NDRG1、NDRG2基因启动子甲基化状态及其蛋白的表达，探讨NDRG1、NDRG2在喉癌组织中的作用及其表达下调或上调的机制，从而为喉癌的病因、诊断及治疗提供新的理论及实验依据。 方法： 1应用甲基化特异性PCR（methylation specific PCR，MSP）技术检测45例喉癌组织、18例癌旁正常组织中NDRG1、NDRG2基因启动子区CpG岛甲基化情况。 2应用免疫组织化学（immunohistochemistry，IHC）S-P法检测45例喉癌组织、18例癌旁正常组织中NDRG1、NDRG2基因蛋白的表达情况。 3统计学分析：所有数据均使用SPSS13.0统计软件进行统计学分析， P＜0.05表示差异在统计学上有显著性意义。 结果： 1NDRG1基因的研究结果 1.1NDRG1基因启动子区甲基化发生率及其与临床病理学资料分析 NDRG1基因启动子区的甲基化发生率在喉癌组及癌旁组中分别为66.7%（30/45），33.3%（6/18），两组比较差异有统计学意义（P0.05）。在喉癌组织中，NDRG1基因启动子区的甲基化发生率与淋巴结转移（P0.05）、临床分期（P0.05）有关，与病例分级、临床分型、肿瘤大小、吸烟量、年龄和性别无关（P0.05）。 1.2NDRG1蛋白的表达及其与临床病理学资料分析 应用免疫组化S-P法检测45例喉鳞癌组织和18例癌旁正常组织NDRG1蛋白的表达情况，其阳性表达率分别为37.8%（17/45）和88.9（16/18），喉癌组织中NDRG1的蛋白表达明显低于癌旁正常组（P0.01）。在喉癌组织中，NDRG1蛋白的表达与淋巴结转移（P0.05）、临床分期（P0.05）有关，与病例分级、临床分型、肿瘤大小、吸烟量、年龄和性别无关（P0.05）。 1.3NDRG1基因启动子区甲基化状态与NDRG1蛋白表达的相关性 在30例NDRG1基因甲基化阳性的病例组中有26例NDRG1蛋白表达缺失。NDRG1基因启动子甲基化与NDRG1蛋白表达密切相关，且呈负相关（r＝-0.713，P0.01）。 2NDRG2基因的研究结果 2.1NDRG2基因启动子区甲基化发生率及其与临床病理学资料分析 NDRG2基因启动子区的甲基化发生率在喉癌组及癌旁组中分别为53.3%（24/45），22.2%（4/18），两组相比较差异有统计学意义（P0.05）。在喉癌组织中，NDRG2基因启动子区的甲基化发生率与淋巴结转移（P0.05）、临床分期（P0.05）有关，与病例分级、临床分型、肿瘤大小、吸烟量、年龄和性别无关（P0.05）。 2.2NDRG2蛋白的表达及其与临床病理学资料分析 NDRG2蛋白在45例喉鳞癌组织和18例癌旁正常组织中的阳性表达率分别为33.3%（15/45）和83.3（15/18），喉癌组织中NDRG2的蛋白表达明显低于癌旁正常组（P0.01）。在喉癌组织中，NDRG2蛋白的表达与淋巴结转移（P0.05）及临床分期（P0.05）有关，与病例分级、临床分型、肿瘤大小、吸烟量、年龄和性别无关（P0.05）。 2.3NDRG2基因启动子甲基化与NDRG2蛋白表达的相关性 在24例NDRG2基因启动子区甲基化阳性的病例组中有21例NDRG2蛋白表达缺失。NDRG2基因启动子区甲基化与NDRG2蛋白表达密切相关，且呈负相关（r＝-0.472，P0.01）。 结论： 1NDRG1及NDRG2基因在喉癌组中呈现高甲基化及蛋白低表达状态,提示NDRG1及NDRG2基因的高甲基化及蛋白的低表达与喉癌的发生有关。 2在喉癌组织中，NDRG1及NDRG2基因启动子区的异常甲基化与淋巴结转移及临床分期有关，提示二者的甲基化可能参与了喉癌的转移和发展。 3在喉癌组织中，，NDRG1及NDRG2蛋白的低表达与淋巴结转移及临床分期有关，提示NDRG1及NDRG2蛋白表达下调可能参与了喉癌的转移和发展。 4在喉癌组织中，NDRG1及NDRG2基因均呈高甲基化及低蛋白表达状态，提示NDRG1及NDRG2基因启动子区CpG岛的异常甲基化可能是抑制NDRG1及NDRG2蛋白表达的机制之一，二者的高甲基化及低蛋白表达可能共同参与喉癌的发生和发展，在喉癌组织中发挥着抑癌基因的作用。
[Abstract]:Objective: laryngeal carcinoma (laryngocarcinoma) is one of the common malignant tumors in otolaryngology head and neck surgery, which accounts for about 1-5% of the malignant tumor of the whole body. The incidence of laryngeal cancer is increased in recent years. Laryngeal squamous cell carcinoma is the most common type of laryngeal squamous cell carcinoma, accounting for about the two mechanisms of genetics and epigenetics in the occurrence of 90%. larynx cancer. The understanding and understanding of larynx cancer at the sub level is getting more and more attention. Among them, the study of epigenetics changes, especially the methylation of DNA promoter region, has become a hot spot for.NDRG1. The NDRG2 gene is a candidate tumor suppressor gene, and their role in the larynx cancer is not clear. This lesson is based on the study of NDRG1, the promoter methylation of the NDRG2 gene. The expression of state and protein and the role of NDRG1 and NDRG2 in laryngeal carcinoma and the mechanism of downregulation and up-regulated expression provide new theoretical and experimental basis for the etiology, diagnosis and treatment of laryngeal cancer.
Method锛

本文编号：1929006