MiR-21促进人视网膜母细胞瘤Weri-RB-1细胞恶性生物学行为及其机制探讨
本文选题：miR-21 + 视网膜母细胞瘤 ； 参考：《南昌大学》2017年博士论文
【摘要】：目的:研究微小RNA-21(microRNA-21,miR-21)在视网膜母细胞瘤(retinoblastoma,RB)Weri-RB-1细胞恶性生物学行为中的影响作用,及其与同源磷酸酶-张力蛋白(PTEN)/磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)/AKT信号通路、p53/p21信号通路之间的关系。方法:本研究采用脂质体转染技术、实时定量PCR技术(qRT-PCR)对RB及Weri-RB-1细胞miR-21的表达水平进行检测;并通过流式细胞术、免疫蛋白印迹法对细胞凋亡比率及相关蛋白表达水平进行了研究。结果:与视网膜正常组织相比,RB组织中miR-21过表达,并具有显著差异(P0.01)。在Weri-Rb-1细胞中,miR-21抑制剂明显降低了miR-21的水平,并降低了细胞存活率(P0.01)。与miR-21阴性对照组(negative control,NC)相比,miR-21抑制剂增加了细胞凋亡比率,并提高了凋亡相关蛋白PDCD4和Bax的表达(P0.01)。而且mi R-21抑制剂不仅抑制了细胞的迁移与侵袭,而且降低了MMPs的蛋白表达水平(P0.01)。此外miR-21抑制剂还通过调节p53/p21蛋白通路,促进了细胞的周期阻滞。结论:miR-21抑制剂通过干扰PTEN/PI3K/AKT信号通路以及p53/p21蛋白通路,抑制了细胞的存活、迁移与侵袭以及细胞周期阻滞。这些实验结果表明:RB中miR-21为促癌基因,为RB的有效治疗提供了新的作用靶点与方法。
[Abstract]:Objective: to investigate the effect of microRNA-21 miR-21) on the malignant biological behavior of retinoblastomaoma RBeri-RB-1 cells and its relationship with the homologous phosphatase tension protein PTENU / phosphatidylinositol 3 kinase PI3KN / AKT signaling pathway p53p21. Methods: the expression of miR-21 in RB and Weri-RB-1 cells was detected by liposome transfection and real-time quantitative PCR, and the expression of miR-21 in RB and Weri-RB-1 cells was detected by flow cytometry. The rate of apoptosis and the expression of related proteins were studied by Western blot. Results: the expression of miR-21 in RB was significantly higher than that in normal retina (P 0.01). In Weri-Rb-1 cells, the inhibitor of miR-21 significantly reduced the level of miR-21 and the cell survival rate. Compared with the negative control group (miR-21 negative control group), mmiR-21 inhibitor increased the apoptosis rate and increased the expression of PDCD4 and Bax. Moreover, mi R-21 inhibitor not only inhibited cell migration and invasion, but also decreased the protein expression level of MMPs. In addition, miR-21 inhibitors promote cell cycle arrest by regulating the p53/p21 pathway. Conclusion the cell survival, migration, invasion and cell cycle arrest were inhibited by interfering with the PTEN / PI3K / AKT signaling pathway and the p53/p21 protein pathway. These results indicate that miR-21 is the oncogene and provides a new target and method for the effective treatment of RB.
【学位授予单位】：南昌大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R739.7
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，本文编号：2002724
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