Livin、Smac及Caspase-3在喉鳞状细胞癌中的表达及意义

发布时间：2019-07-26 13:58

【摘要】：目的：喉癌约占全身恶性肿瘤的1％～5%，其主要病理类型为鳞状细胞癌，约占喉癌的90%，近年来发病率有日益增高的趋势。研究发现细胞增殖与细胞凋亡之间平衡的紊乱是影响喉癌发生发展的诸多因素之一。凋亡抑制蛋白（inhibitor of apoptosis protein,IAPs）家族中的Livin蛋白具有抗细胞凋亡的活性。天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3(cysteinylaspartate-specific proteinase3,Caspase-3)是哺乳动物细胞凋亡中的关键蛋白酶之一。Caspase的第2个线粒体激活因子（Second mitochondria-derivedactivator of caspases,Smac）可与Livin基因的BIR结构域特异性结合，从而抑制Livin的抗细胞凋亡作用，加速细胞凋亡。Caspase-3和Smac可以对Livin的抗细胞凋亡活性起负向调节作用。本课题在喉癌组织、癌旁组织及正常喉黏膜组织中研究Livin、Smac及Caspase-3的定量及定性表达情况，探讨Livin、Smac及Caspase-3在喉癌发生发展中的作用和可能的机制，以及三者表达的相关性，进而为喉癌的预防、临床治疗以及复发监测提供理论基础。方法： 1应用免疫组织化学法（Immunohistochemistry,IHC）的S-P法定性检测38例喉癌组织、21例癌旁组织和17例正常喉黏膜组织中Livin、 Smac及Caspase-3的表达情况。 2应用流式细胞技术法（Flow Cytometrye,FCM）定量检测38例喉癌组织、21例癌旁组织和17例正常喉黏膜组织中Livin、Smac及Caspase-3 的表达情况。 3应用SPSS13.0对研究数据进行统计分析，以P≤0.05为统计学上有显著性差异，P≤0.01为统计学上有非常显著性差异。结果： 1Livin的表达 1.1免疫组化法：应用免疫组织化学S-P法检测喉癌组织、癌旁组织和正常喉黏膜组织中Livin的表达情况：在喉癌、癌旁及正常喉黏膜组织中其表达强度呈下降趋势，三组相比有非常显著性差异（P＜0.01）。两两比较发现，喉癌组Livin的表达明显高于癌旁组（P＜0.01）及正常喉黏膜组（P＜0.01），癌旁组与正常喉黏膜组相比无显著性差异（P＞0.05）。证实Livin的阳性表达与肿瘤的临床分期、淋巴结转移、病理分级（P＜0.05）有关，与临床分型、肿瘤大小、吸烟量、年龄和性别无关（P＞0.05）。 1.2流式细胞术：检测Livin在喉癌组织、癌旁组织及正常喉黏膜组织中的表达量（FI值）呈下降趋势，三组相比有非常显著性差异（P＜0.01）。喉癌组中Livin表达量明显高于癌旁组（P＜0.01）及正常喉黏膜组（P＜0.01），而癌旁组与正常喉黏膜组相比无显著性差异（P＞0.05）。在喉癌组织中，Livin与临床分期（P＜0.05）、淋巴结转移（P＜0.01）及病理分级（P＜0.05）有关；与临床分型、肿瘤大小、吸烟量、年龄和性别无关（P＞0.05）。 2Smac的表达 2.1免疫组化法：应用免疫组织化学S-P法检测喉癌组织、癌旁组织和正常喉黏膜组织中Smac的表达情况：在喉癌、癌旁及正常喉黏膜组织中其表达强度呈上升趋势，，三组相比有非常显著性差异（P＜0.01）。两两比较发现，喉癌组中Smac表达量低于癌旁组（P＜0.05）及正常喉黏膜组（P＜0.05），而癌旁组与正常喉黏膜组相比无显著性差异（P＞0.05）。证实Smac的阳性表达与临床分期（P＜0.05）、淋巴结转移（P＜0.01）及病理分级（P＜0.01）有关；与临床分型、肿瘤大小、吸烟量、年龄和性别无关（P＞0.05）。 2.2流式细胞术：检测Smac在喉癌组织、癌旁组织及正常喉黏膜组织中的表达量（FI值）呈上升趋势，三组相比有非常显著性差异（P＜0.01）。喉癌组中Smac表达量明显低于癌旁组（P＜0.01）及正常喉黏膜组（P＜0.01），而癌旁组与正常喉黏膜组相比无显著性差异（P＞0.05）。在喉癌组织中，Smac与临床分期（P＜0.05）、淋巴结转移（P＜0.01）及病理分级（P＜0.05）有关；与临床分型、肿瘤大小、吸烟量、年龄和性别无关（P＞0.05）。 3Caspase-3的表达 3.1免疫组化法：应用免疫组织化学S-P法检测喉癌组织、癌旁组织和正常喉黏膜组织中Caspase-3的表达情况：在喉癌、癌旁及正常喉黏膜组织中其表达强度呈上升趋势，三组相比有非常显著性差异（P＜0.01）。两两比较发现，喉癌组中Caspase-3表达量明显低于癌旁组（P＜0.05）及正常喉黏膜组（P＜0.01），而癌旁组与正常喉黏膜组相比无显著性差异（P＞0.05）。证实Caspase-3的阳性表达与临床分期、淋巴结转移及病理分级（P＜0.05）有关；与临床分型、肿瘤大小、吸烟量、年龄和性别无关（P＞0.05）。 3.2流式细胞术：检测Caspase-3在喉癌组织、癌旁组织及正常喉黏膜组织中的表达量（FI值）呈上升趋势，三组相比有非常显著性差异（P＜0.01）。喉癌组中Caspase-3表达量明显低于癌旁组（P＜0.01）及正常喉黏膜组（P＜0.01），而癌旁组与正常喉黏膜组相比无显著性差异（P＞0.05）。在喉癌组织中，Caspase-3与临床分期（P＜0.01）、淋巴结转移（P＜0.01）及病理分级（P＜0.05）有关；与临床分型、肿瘤大小、吸烟量、年龄和性别无关（P＞0.05）。 4Livin、Smac与Caspase-3在喉癌组织中的相关性 4.1Livin与Smac的相关性：Livin蛋白表达量（FI值）与Smac蛋白表达量（FI值）呈直线负相关，直线回归方程为Y=2.379-0.642X(r=-0.830,P=0.000)。 4.2Livin与Caspase-3的相关性：Livin蛋白表达量（FI值）与Caspase-3蛋白表达量（FI值）呈直线负相关，直线回归方程为Y=2.654-1.109X(r=-0.818,P=0.000)。 4.3Smac与Caspase-3的相关性：Smac蛋白表达量（FI值）与Caspase-3蛋白表达量（FI值）无相关性(r=0.262,P=0.1130.05)。结论： 1Livin蛋白在喉癌组织中高表达，在癌旁组织和正常喉黏膜组织中呈低表达或不表达。 2Smac及Caspase-3蛋白在喉癌组织、癌旁组织及正常喉黏膜组织中均有表达，且表达率呈上升趋势。 3Livin蛋白在喉癌组织中的表达强度及表达量较癌旁组织及正常喉黏膜组织明显增高；而Smac及Caspase-3蛋白在喉癌组织中的表达强度及表达量较癌旁组织及正常喉黏膜组织明显减低。提示Livin的高表达及Smac、Caspase-3的低表达可能与喉癌的发生、发展有关。 4Livin、Smac与Caspase-3蛋白在喉癌组织中的表达均与临床分期、淋巴结转移及病理分级有关；与临床分型、肿瘤大小、吸烟量、年龄和性别无关。提示Livin的高表达及Smac、Caspase-3的低表达可能与喉癌的侵袭和转移有关。 5喉癌组织中Livin与Smac、Caspase-3蛋白表达有关，且Livin蛋白的表达量随着Smac和Caspase-3蛋白表达量的增高而降低，均呈直线负相关关系。提示Livin与Smac、Caspase-3蛋白之间存在相互调节作用，同时Smac能够促进Caspase-3发挥生理功能，但未显示直线相关关系。
【学位授予单位】：河北医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2012
【分类号】：R739.65

【参考文献】