视网膜感光细胞cGMP通道对不同光照时间损伤的时效关系及防护机制的研究

发布时间：2021-03-12 19:42

目的:研究视网膜感光细胞cGMP选控通道对不同的光照时间损伤的时效反应关系,阐明防护机制。方法:将661w细胞放置于4500Lux可见光下,分别设定3天、4天和5天三个光照周期。在三个光照周期中每天只照射相应时间段(20分钟,30分钟,60分钟,90分钟,120分钟,180分钟),其余时间放于孵育箱中培养,不加其他处理。用Hoechst/PI(二苯甲亚胺/碘化丙啶)染色法检测细胞活性及计算细胞死亡率;通过Western Blot和荧光定量PCR分别在蛋白水平和m RNA水平检测cGMP选控通道标志物GCAP1和cGMP的变化。结果:1.无论在暗处还是光照环境中,661w细胞在3天内的死亡率低且相差不大,从第四天开始死亡率显著增高,光照细胞比暗处细胞死亡率高,并且光照时间越长,细胞死亡率就越高,到第五天细胞趋近于全部死亡。2.在光照三天时,cGMP调控通道中的相关因子GCAP1和cGMP在20分钟,90分钟表达显著;光照四天后,GCAP1和cGMP在20分钟,60分钟表达显著。光照五天后,GCAP1和cGMP仅在30分钟时有显著表达,其他时间段没有明显表达。结论:不同光照时间,对661w细胞的损伤有时效反应关系;GCAP1和cGMP的表达变化可能与光诱导的细胞代谢损伤修复有关。
【学位授予单位】：吉林大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R774.1

文章目录

摘要

Abstract

英文缩略词

第一章引言

第二章综述

1.视网膜光损伤

2.光损伤对视网膜感光细胞代谢增殖的影响

2.1 光损伤对视网膜感光细胞的影响

2.1.1 感光细胞的正常代谢过程

2.1.2 光损伤研究中感光细胞的相关因子

2.1.3 光损伤中感光细胞的病理改变

3.cGMP选控通道在视网膜光损伤中的影响

4.展望

第三章材料与方法

3.1 实验材料

（1）试剂

（2）主要仪器和设备

3.2 实验方法

（1）细胞培养

（2）光照组和对照组细胞的处理方法

（3）Hoechst/PI染色

（4）Western Blot实验

（5）实时定量PCR

3.3 统计学方法

第四章实验结果

4.1 661w细胞光照处理的形态学表现

4.2 Western Blot检测cGMP调控通路中蛋白标志物的变化

4.3 RT-PCR检测c GMP调控通路中标志物mRNA的变化

第五章讨论

第六章结论

参考文献

作者简介及在学期间所取得的科研成果

致谢

【参考文献】