急性高海拔视网膜病变机制的实验研究

发布时间：2019-10-23 05:56

【摘要】：目的:通过观察在模拟5000m高海拔缺氧条件下大鼠视网膜组织病理形态改变、细胞早期凋亡率、caspase-3和p53的表达,探讨急性高海拔视网膜病变的发生机制。方法:成年雌性wistar大鼠70只,随机分入对照组和实验组。对照组10只,饲养于海拔高度为1500m的室内环境(兰州市海拔高度,氧分压为17.6 k Pa);实验组60只,分为6组,每组10只,分别饲养于模拟海拔高度为5000m的高原环境模拟实验舱(氧分压为11.3 k Pa)中2h、6h、12h、24h、48h、72h。各组大鼠处死后,迅速摘除眼球行HE染色观察大鼠视网膜病理形态的改变;行免疫组化染色观察大鼠视网膜caspase-3和p53的表达,采用IPP软件计算阳性细胞的平均吸光度值(A),并分析caspase-3与p53表达的相关性;通过流式细胞仪检测视网膜细胞早期凋亡率。结果:1.HE染色结果:对照组大鼠视网膜各层组织结构清楚、完整,厚度均匀一致,神经节细胞呈单层排列,细胞核较大,呈椭圆形;实验组大鼠视网膜各层组织水肿疏松,视网膜厚度增加,排列层次紊乱,神经节细胞层出现空泡变性,并随着缺氧时间延长视网膜病理损伤越明显。2.视网膜caspase-3、p53表达结果:对照组大鼠视网膜组织中p53、caspase-3仅在神经节细胞层有微量表达或不表达;实验组caspase-3和p53在模拟缺氧损伤2h后即检测到表达,并随着缺氧时间延长,两者表达逐渐增加,差异均具有统计学意义(P0.05)。通过Spearman相关性分析,大鼠视网膜组织中caspase-3与p53的表达水平呈正相关(r=0.832,P0.001)。3.视网膜细胞早期凋亡率检测结果:对照组平均细胞早期凋亡率为0.46%;实验组细胞早期凋亡率随缺氧时间延长逐渐升高,48h组升高明显。2h组与对照组比较无显著性差异(P=0.213);其余各组两两比较,差异均具有统计学意义(P0.01)。结论:1.模拟5000m高海拔缺氧条件可造成大鼠视网膜的组织损伤,导致视网膜出现病理形态改变。2.细胞凋亡可能参与了模拟高海拔缺氧的大鼠视网膜损伤机制,并通过caspase-3依赖的凋亡通路发挥作用。
【图文】：

高海拔,组织病理,对照组,视网膜病变

学硕士学位论文急性高海拔视网膜病变机制的实验研究12图-1 模拟 5000m 高海拔缺氧不同时间点的大鼠视网膜的组织病理图像（HE ×400）（1A:对照组；1B:2h 组；1C:6h 组；1D：12h 组；1E:24h 组；1F:48h 组；1G：72h 组）

高海拔,免疫组织化学染色,对照组,图像

学硕士学位论文急性高海拔视网膜病变机制的实验研究16图-2 模拟 5000m高海拔缺氧不同时间点的大鼠视网膜免疫组织化学染色图像（DBA×400）。（p53 的表达：2A:对照组；2B:2h 组；2C:6h 组；2D：12h 组；2E:24h 组；2F:48h 组；2G：72h 组。caspase-3 的表达：3A:对照组；3B:2h 组；3C:6h 组；3D：12h 组；3E:24h 组；3F:48h组；3G：72h 组。）表-1 模拟 5000m 高海拔缺氧不同时间点的大鼠视网膜 p53、caspase-3 表达比较 ( x sn=5)p53 caspase-3组别对照组实验组对照组实验组对照组 0.087±0.031 — 0.076±0.012 —2h — 0.121±0.011 — 0.113±0.0076h — 0.162±0.014 — 0.158±0.03212h — 0.213±0.021 — 0.273±0.05724h — 0.356±0.063 — 0.394±0.02148h — 0.391±0.037 — 0.429±0.01872h — 0.421±0.028 — 0.461±0.063注：模拟 5000m 高海拔缺氧不同时间点的各实验组与对照组相比较，p53 和 caspase-3 的表达均有统计学差异，，P<0.05。
【学位授予单位】：兰州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R774.1

【参考文献】