WRN的表达及表观遗传学改变与年龄相关性白内障的关系

发布时间：2017-03-23 00:03

  本文关键词：WRN的表达及表观遗传学改变与年龄相关性白内障的关系，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的本文旨在探索DNA氧化损伤修复基因WRN在年龄相关性白内障(age-related cataract,ARC)患者晶状体上皮细胞(lens epithelial cells,LECs)和晶状体皮质中的表达及甲基化状态与组蛋白修饰,并分析其表达与表观遗传修饰的关系。方法本实验设计为临床病例对照研究。病例组由2013年8月-2014年8月在南通大学附属医院眼科诊断为ARC并接受白内障手术的患者组成,包括皮质性、核性、后囊下性三种类型ARC,每种各39例39眼;对照组为本院眼科诊断为玻璃体视网膜疾病,因年龄或手术等因素需要在玻璃体切除手术中同时作透明晶状体摘除者,共39例39眼,与病例组患者年龄相匹配。实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)分析WRN基因m RNA表达水平,蛋白质免疫印迹(Western blot)分析蛋白质表达量,甲基化特异性PCR法(BSP)检测WRN的甲基化状态。染色质免疫共沉淀(CHIP)分析检测WRN的组蛋白修饰状态。对人晶状体上皮细胞株(HLEB-3)进行5-氮杂-2′-脱氧胞苷(5-Aza-2′-deoxycytidine,5-aza-d C)和曲古霉素(TSA,trichostatin A)处理后检测WRN表达的变化。结果与对照组相比,ARC患者LECs中WRN基因m RNA及蛋白质表达均下调(F=162.82,P0.01;F=68.72,P0.01)。但是在病例组和对照组患者的晶状体皮质中均没有检测到WRN的表达。在ARC患者LECs中WRN基因启动子区Cp G岛呈现高甲基化(F=104.01,P0.01)。ARC组患者与对照组患者的晶状体皮质中WRN基因启动子区Cp G岛甲基化率差异无统计学意义。与对照组相比,ARC患者LECs中H3乙酰化水平较低而H3K9三甲基化水平则较高(F=67.00,P0.01;F=21.40,P0.01)。经5-aza-d C和TSA处理后,HLEB-3中WRN蛋白表达升高(t=0.32,P0.01;t=0.36,P0.01)。结论WRN基因表达的下调可能与ARC的发生发展相关。WRN基因启动子区Cp G岛的DNA甲基化及组蛋白修饰可能调节其表达,与ARC的发病机制相关。
【关键词】：WRN 年龄相关性白内障 晶状体 DNA甲基化 组蛋白修饰 表观遗传学
【学位授予单位】：南通大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R776.1
【目录】：

• 英文缩写词 (Abbreviation)5-7
• 中文摘要 (Abstract in Chinese)7-9
• 英文摘要 (Abstract in English)9-11
• 前言 (Introduction)11-13
• 材料和方法 (Materials and Methods)13-26
• 结果 (Results)26-36
• 讨论 (Discussion)36-39
• 结论 (Conclusions)39-40
• 参考文献 (References)40-43
• 综述 (Review)43-53
• 综述参考文献 (References)48-53
• 在攻读硕士学位期间公开发表的论文 (Published Articles)53-54
• A 在国内学术会议上发表的论文53
• B 在国内外刊物上发表的论文53
• C 参加的项目53-54
• 在攻读硕士学位期间获得的主要荣誉54-55
• 致谢 (Acknowledgements)55

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本文编号：262487